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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 求助！！！急！！α-葡萄糖苷酶抑制实验空白组始终不显色，可能是什么原因？
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1195765212

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by g2peng at 2017-04-26 18:18:20
请问解决没，我们也是这种问题，开始买的国产的酶，后来换成sigma的，浓度也试验了几种，都没反应，现在不知是什么问题

麻烦问下你的问题解决了吗，我也遇到同样的问题，酶是新买的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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11楼2018-06-04 17:13:40
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维尼熊smile

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ddrr1992 at 2017-05-27 12:19:26
请问解决没有啊？我也在做这个，也是发现这个问题，酶浓度增加到14u/mL也没有用，就是不显色

请问你们这个问题解决了吗？我也遇到这种问题OD值几乎没有，我单独拿PNPG溶解测了一个OD值，还能到0.18呢，通过酶反应竟然没有吸光度了，可否指教一下，谢谢

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12楼2018-06-08 20:10:38
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维尼熊smile

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 1195765212 at 2018-06-04 17:12:24
我也遇到了这个问题，请问你解决了吗😭
...

我也是这样的问题，请问解决了吗，可以探讨一下吗

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13楼2018-06-23 20:25:15
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维尼熊smile

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 吴月芽2009 at 2018-03-15 17:23:06
60 μL 磷酸钾缓冲液 (pH 6.8)，加入 0.2 U/mL α-葡萄糖苷酶 20 μL，样本溶液10 μL，37 ℃ 恒温 15 min 后加入 2.5 mmol/L PNPG 20μL，37 ℃ 恒温反应 30 min。再加入 0. 2 mol/L的Na2CO3水溶液 80 μL，于 405 ...

请问你的这个问题解决了吗？可否探讨一下

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14楼2018-08-26 20:58:07
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LCQAADXX

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 1195765212 at 2018-06-04 17:12:24
我也遇到了这个问题，请问你解决了吗😭
...

请问您的问题解决了吗？我也遇到这样的问题
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15楼2018-10-23 17:41:01
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初见166

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

遇到同样的问题，酶和PNPG都换成最新的了，还是不显色，和反应温度有关吗？看到有的文献孵育温度50℃。
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16楼2020-07-02 15:47:40
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矮矬穷笨傻

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我当时一次成功的。60摄氏度烘箱，还有PH和酶浓度的问题，多试试。ph4的适合37摄氏度，ph6.8的60摄氏度。多看文献哦。我两年前做过，显色着呢
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17楼2020-07-02 17:15:26
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亘古心觞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 1195765212 at 2018-06-04 17:12:24
我也遇到了这个问题，请问你解决了吗😭
...

请问解决了吗，我现在也遇到了这个问题

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18楼2021-04-19 10:25:49
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小芳草Emma

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 亘古心觞 at 2021-04-19 10:25:49
请问解决了吗，我现在也遇到了这个问题
...

问题解决了吗？我也遇到了这个问题，但发现可能是PNPG买错了。测定的麦克林给的pNPG是对硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷，但应该用对硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷。打算重新买再试试。
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19楼2022-05-07 12:44:12
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