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清雅桃子

金虫 (小有名气)

[求助] 求助!!!急!!α-葡萄糖苷酶抑制实验空白组始终不显色,可能是什么原因?已有5人参与

112 μL 磷酸钾缓冲液 (pH 6.8),加入 0.2 U/mL α-葡萄糖苷酶 20 μL,样本溶液 8 μL,37 ℃ 恒温 15 min 后加入 2.5 mmol/L PNPG 20μL,37 ℃ 恒温反应 15 min。再加入 0. 2 mol/L的Na2CO3水溶液 80 μL,于 405 nm 波长下测 A 值

酶,pnpg均是新买的,所有试剂重新配过,1mol/L的Na2CO3也试过,反应时间也延长了,始终没有颜色,希望做过的同学帮忙指点迷津,万分感谢!!!
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初见166

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

遇到同样的问题,酶和PNPG都换成最新的了,还是不显色,和反应温度有关吗?看到有的文献孵育温度50℃。
16楼2020-07-02 15:47:40
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