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清雅桃子

金虫 (小有名气)

[求助] 求助!!!急!!α-葡萄糖苷酶抑制实验空白组始终不显色,可能是什么原因?已有5人参与

112 μL 磷酸钾缓冲液 (pH 6.8),加入 0.2 U/mL α-葡萄糖苷酶 20 μL,样本溶液 8 μL,37 ℃ 恒温 15 min 后加入 2.5 mmol/L PNPG 20μL,37 ℃ 恒温反应 15 min。再加入 0. 2 mol/L的Na2CO3水溶液 80 μL,于 405 nm 波长下测 A 值

酶,pnpg均是新买的,所有试剂重新配过,1mol/L的Na2CO3也试过,反应时间也延长了,始终没有颜色,希望做过的同学帮忙指点迷津,万分感谢!!!
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hydros

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
猜测可能是酶的浓度太低。不同批次不同来源的酶活度不一样,建议酶的用量加大到1 U/ml试试

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2017-03-02 09:35:26
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清雅桃子

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hydros at 2017-03-02 09:35:26
猜测可能是酶的浓度太低。不同批次不同来源的酶活度不一样,建议酶的用量加大到1 U/ml试试

上周刚到的Sigma的酶,我看几乎所有的酶活都是用的0.2U的,请问酶在用之前需要37度孵育一下吗,谢谢啦
4楼2017-03-02 10:20:29
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hydros

金虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 清雅桃子 at 2017-03-02 10:20:29
上周刚到的Sigma的酶,我看几乎所有的酶活都是用的0.2U的,请问酶在用之前需要37度孵育一下吗,谢谢啦...

不需要

发自小木虫Android客户端
5楼2017-03-02 11:10:14
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1505363338

新虫 (初入文坛)

问一下,你的问题解决了吗?我也碰到了一样的问题

发自小木虫Android客户端
6楼2017-03-17 16:54:28
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