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littlepieyes

铜虫 (小有名气)

[求助] 挑单菌落用LB摇种子液,但是换培养基后仍染菌?? 已有5人参与

由于染菌所以划平板挑取单菌落,用枪头蘸取单菌落置于LB液体培养基扩增,换用M9培养基进行诱导表达蛋白,但是出现黑色点状杂质。难道需要多次纯化挑取单菌落吗?还是说质粒已经严重污染无法用挑取单菌落的方法?急求!!!!
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小冀-

版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
littlepieyes: 金币+5, 有帮助, 好的,我试试,谢谢 2017-02-27 19:46:17
用枪头蘸取菌落本来风险就很大,我们都是鉴定的时候用,如果做发酵的话,最好还是用接种环
···
2楼2017-02-27 18:16:01
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普通回帖

刘大真

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
littlepieyes: 金币+1, 有帮助, 已经加入抗生素 2017-03-03 15:58:13
工程菌的话可与可以考虑加抗生素
3楼2017-03-02 15:23:06
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caojian2016

新虫 (初入文坛)

最好是用接种环 枪头染菌可能性比较大

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-03-02 15:39:54
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小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


littlepieyes: 金币+1, 有帮助 2017-03-03 15:58:59
取菌方式方法不对
5楼2017-03-03 10:38:19
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littlepieyes

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小花木兰 at 2017-03-03 10:38:19
取菌方式方法不对

那可能是枪头污染的可能性很大。能再具体点吗?
6楼2017-03-03 16:00:39
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heiye402

禁虫 (小有名气)

★ ★
littlepieyes: 金币+2, 有帮助 2017-03-03 21:32:47
本帖内容被屏蔽

7楼2017-03-03 17:17:47
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heiye402

禁虫 (小有名气)

★ ★
littlepieyes: 金币+2, 有帮助, 好的,会更注意一些 2017-03-03 21:33:25
本帖内容被屏蔽

8楼2017-03-03 17:20:50
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heiye402

禁虫 (小有名气)

★ ★
littlepieyes: 金币+2, 有帮助 2017-03-04 22:01:05
本帖内容被屏蔽

9楼2017-03-03 22:12:38
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

划线后的单克隆鉴定了吗?枪头灭菌后这样操作是没问题的,为什么要用M9诱导蛋白表达,换培养基过程中太容易污染了,菌液培养到0.4到0.6可以跟直接加诱导剂诱导

发自小木虫Android客户端
10楼2017-03-04 14:04:33
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