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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 挑单菌落用LB摇种子液，但是换培养基后仍染菌？？
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littlepieyes

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by heiye402 at 2017-03-03 22:12:38
对了，给你说个技巧，你可以把菌种还有抗生素加到瓶口的位置，只把枪头伸进去，枪别进去，然后用培养基把菌种和抗生素晃进去，有一次我们老板给我们示范他是这么做的，具他说他以前在美国都是这么弄的，不过我们这边 ...

我也是这么做的，还是染菌。感觉是菌种有问题，就是黑点一个个的，闹心啊，再这么下去要毕不了业了
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11楼2017-03-04 22:01:48
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littlepieyes

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2017-03-04 14:04:33
划线后的单克隆鉴定了吗？枪头灭菌后这样操作是没问题的，为什么要用M9诱导蛋白表达，换培养基过程中太容易污染了，菌液培养到0.4到0.6可以跟直接加诱导剂诱导

参考文献中是用M9这个方法的，况且师姐们做都没有问题，划线的单克隆没有鉴定过，本来是想直接通过M9来判断的，不染菌的话觉得就没问题了
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12楼2017-03-04 22:12:13
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heiye402

禁虫 (小有名气)
★
littlepieyes: 金币+1 2017-03-05 16:40:47
本帖内容被屏蔽
13楼2017-03-04 23:59:47
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by littlepieyes at 2017-03-04 22:12:13
参考文献中是用M9这个方法的，况且师姐们做都没有问题，划线的单克隆没有鉴定过，本来是想直接通过M9来判断的，不染菌的话觉得就没问题了...

划完线的单克隆做个菌液pcr吧

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14楼2017-03-05 05:11:14
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luoyansweet

新虫 (著名写手)
用接种环啊，谁教你用枪头挑菌的啊

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15楼2017-03-05 08:19:52
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309486980

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
littlepieyes: 金币+2, ★有帮助 2017-05-13 14:27:35
在更换培养基的时候可以考虑在更换之前把要用的东西用紫外照射5-10分钟，保证使用的枪头，试管，摇瓶等彻底灭菌。在打开和盖上试管（摇瓶）时将瓶口在酒精灯下烧一下。尽量避免在开口的试管上方进行操作，一般注意一点都不会染菌的。
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16楼2017-03-08 14:43:48
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