24小时热门版块排行榜    

查看: 405  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 重组质粒验证出的问题!

我刚构建好的表达载体用双酶切可以切出目的条带(1.1kb左右)和载体,效果很好;,然后想通过PCR再验证一次,这个时候怪事出现了,PCR产物有两条,一个为1;1kb左右的条带很淡;另一个为2kb左右的条带很亮,我怀疑我的反应体系有问题,改变条件重做了两次还是出现同样的问题。大家有没有出现过,怎么解释。谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

霉菌
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
在提质粒的时候顺便提两管空质粒,看你的重组有抬高没有,有抬高的基本就确定是重组成功了,我这样做过十几次了,还没有出错过。PCR验证常出错的,基本上是不可信的,测序结果是最准确的
6楼2008-12-21 14:29:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

yasmine

银虫 (正式写手)

直接将该质粒交公司测序,是最快的方法吧

[ Last edited by yasmine on 2008-12-21 at 10:03 ]
想到达明天,今天就要起飞
2楼2008-12-20 21:04:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐常在

金虫 (小有名气)

我想问下,你重新设计过引物吗?
3楼2008-12-20 21:23:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐常在

金虫 (小有名气)

我想问下,你重新设计过引五做吗?后面的结果还是那样吗?
4楼2008-12-20 21:26:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见