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王平阳

金虫 (正式写手)

[求助] 关于酶切的大反应体系问题 已有1人参与

我有个师妹,在公司上班被分配任务摸索酶切大反应体系,具体指500uL体系和1mL体系,不能是小反应体系累加,敢问各位老师、师兄师姐有什么建议?
1.用的双酶切体系,具体各个组分加多少?
2.反应时间如何控制?
3.如何检测酶切效果?
麻烦各位了,能回答哪条就回答那条。 @youlinglyw
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没有做不到,只有想不到!
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bush119

木虫 (职业作家)

灌水高手

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、外购酶的话每个公司产品最适buffer都不一样,各组分也不一样,可以参照说明书自己摸索条件;自制酶的话,你自己最清楚活力如何,最适buffer还得自己摸索。
2、摸索反应时间,设置时间梯度,比如每隔一小时取出来5ul 跑个胶。
3、检测效果,跑胶比较直观又简单。
2楼2017-02-23 10:50:27
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