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cDNA文库构建中的问题
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有没有人在用或是用过的clontech的Creator™ SMART™ cDNA Library Construction Kit 。在做得过程中有什么特别要注意的地方啊？ 1：这个试剂盒不提供反转录酶，大家用得是哪个公司的酶，还是用clontech推荐的MMLV Reverse Transcriptase，这个酶要多少钱？ 2：在合成第一链时RNA的用量是不是按试剂说明的量添加，不用加大量吗？ 3：合成第一链时的保温实在PCR仪中做还是水浴锅中？所用的离心管，枪头用0.1%depc水浸泡过夜，高压灭菌就好了是吧（121度、20min），好像灭好了还有味道啊，是不是灭的不彻底啊，会不会对试验有影响啊。 总之就是，如何做才能构建高质量的cDNA文库。 谢谢您的回答 |
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