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cDNA文库构建中的问题
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有没有人在用或是用过的clontech的Creator™ SMART™ cDNA Library Construction Kit 。在做得过程中有什么特别要注意的地方啊? 1:这个试剂盒不提供反转录酶,大家用得是哪个公司的酶,还是用clontech推荐的MMLV Reverse Transcriptase,这个酶要多少钱? 2:在合成第一链时RNA的用量是不是按试剂说明的量添加,不用加大量吗? 3:合成第一链时的保温实在PCR仪中做还是水浴锅中?所用的离心管,枪头用0.1%depc水浸泡过夜,高压灭菌就好了是吧(121度、20min),好像灭好了还有味道啊,是不是灭的不彻底啊,会不会对试验有影响啊。 总之就是,如何做才能构建高质量的cDNA文库。 谢谢您的回答 |
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daydayup2005
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