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evasong

铜虫 (小有名气)

[交流] 用流式测粒细胞抗原,应该选哪种白细胞裂解液 已有2人参与

求教各位专家!我想用流式检测人粒细胞表面抗原,打算用percoll法提取中性粒,然后裂解粒细胞,再用流式检测细胞碎片上的抗原蛋白。因此细胞碎片应该尽可能小,请问应该用那种白细胞裂解液?

谢谢!
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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8楼: Originally posted by evasong at 2017-02-27 09:25:35
嗯嗯,谢谢!请问可不可以告诉我固化的具体方法?...

我们是先按正常步骤标记上荧光抗体。然后用比如200微升的PBS重悬细胞。我们的固定液都是配3%的母液(4度避光保存的)。再向200微升的样品中加入100微升的3%多聚甲醛混匀,放在4度避光保存就行了。

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读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
9楼2017-02-27 10:47:16
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
检测细胞表面抗原不需要裂解细胞吧。直接用抗体标记不就行了?

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读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
2楼2017-02-22 17:21:45
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evasong

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by keke226 at 2017-02-22 17:21:45
检测细胞表面抗原不需要裂解细胞吧。直接用抗体标记不就行了?

谢谢您的回复。因为细胞生存期短,我想把细胞裂解后保存,然后用BCA磁珠法检测细胞膜碎片上的抗原。请问您有什么好建议吗?
3楼2017-02-23 09:37:32
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by evasong at 2017-02-23 09:37:32
谢谢您的回复。因为细胞生存期短,我想把细胞裂解后保存,然后用BCA磁珠法检测细胞膜碎片上的抗原。请问您有什么好建议吗?...

磁珠我也没用过。我们以前用流式测表面抗原。不能马上检测的话,会向细胞中加固定液,放在在4度保存两三天再测也可以。

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读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
4楼2017-02-23 12:34:16
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