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weizengmiao新虫 (小有名气)
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[求助]
原核表达重组质粒酶切求助！！！！！！！！！已有1人参与
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| 各位老师，我的重组质粒大小在6600kb左右，pcr结果阳性，重组质粒设计引物，然后测序，结果也证实构建成功的。但是我酶切无数次了都没有切除我的900 bp的条带。设计的酶切位点是EcoRI和KpnI，所用的缓冲液是T+BSA。酶切体系为 质粒 5 uL、酶各1 uL、缓冲液 1 uL，酶切体系为20 uL。酶切时间2 h、3 h、4 h、12 h 都做过，都没有目的片段，只有一条比重组质粒小一点的条带。有没有老师也遇到过这种情况呀？我问题出在哪里呢？快绝望了。求指导呀！！！！ |
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weizengmiao
新虫 (小有名气)
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- 专业: 兽医传染病学
3楼2017-02-21 22:32:35