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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR产物回收
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xtmgah31

银虫 (小有名气)

[交流] PCR产物回收

今天用蓝罡的PCR产物回收试剂盒回收我的东西，后来发现，回收回来的东西放在-21度不会凝固，打开后一闻，有很浓的酒精味，真是郁闷死了，我是一步步按照试剂盒上的步骤操作的，两次洗涤后还换了管子空离了3min，竟然还会有乙醇的残留，以前都没碰到这样的情况。请问，我现在要怎么拯救我的PCR产物啊，这是我好不容易才P出来的？我的PCR产物是用来跑变性梯度凝胶电泳（DGGE）的，如果不作任何处理，DNA在含乙醇的容易中会坏掉吗？

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-2 at 15:14 ]
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1楼 2008-12-18 22:05:54
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eaglezheng

铁虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
pcr产物回收很好做，多半是你没有仔细阅读说明书，比如要求彻底晾干酒精，你没注意
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2楼2008-12-18 22:50:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
…………
什么牌子啊
选国产至少也选天根啦~~~
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3楼2008-12-18 23:40:29
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
天根也不是国产的啊 建议你在加水洗脱前 在超净台上吹30min 应该就可以去除乙醇
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4楼2008-12-19 17:11:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
天根就是国产的
我知道很多人会把天根和QIAGEN混起来
完全不同档次的货……
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5楼2008-12-19 17:23:26
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figo.339

木虫 (著名写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
洗脱前放置时间太少了，应该20分钟左右，以彻底晾干酒精
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6楼2008-12-19 20:05:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
用好一点的试剂盒完全不用考虑这些问题………………
关键技术就是：
溶胶液是否能够保护DNA，是否能够保证凝胶彻底解体，QIAGEN的溶胶液就算放4度也能自发溶胶，不用加热
还有就是膜结合能力和特异性的技术
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7楼2008-12-19 23:36:35
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jlcccs

木虫 (正式写手)
有点意思
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8楼2008-12-21 19:50:20
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bone0611

可能是乙醇没吹干净，还有漂洗液加酒精的量是否正确
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9楼2008-12-28 23:05:52
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
放置通风橱就可以了，不需要离心，乙醇挥发的很快的，之前可以先用微量的移液器吸一下。
PCR产物在任何溶剂里边都不能长期保存，很容易讲解的，建议不要长期保存，更不用说在乙醇里了
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会当凌绝顶，一览众山小
10楼2008-12-28 23:34:42
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