24小时热门版块排行榜    

查看: 1247  |  回复: 14
当前主题已经存档。

xtmgah31

银虫 (小有名气)

[交流] PCR产物回收

今天用蓝罡的PCR产物回收试剂盒回收我的东西,后来发现,回收回来的东西放在-21度不会凝固,打开后一闻,有很浓的酒精味,真是郁闷死了,我是一步步按照试剂盒上的步骤操作的,两次洗涤后还换了管子空离了3min,竟然还会有乙醇的残留,以前都没碰到这样的情况。请问,我现在要怎么拯救我的PCR产物啊,这是我好不容易才P出来的?我的PCR产物是用来跑变性梯度凝胶电泳(DGGE)的,如果不作任何处理,DNA在含乙醇的容易中会坏掉吗?

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-2 at 15:14 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eaglezheng

铁虫 (小有名气)

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
pcr产物回收很好做,多半是你没有仔细阅读说明书,比如要求彻底晾干酒精,你没注意
2楼2008-12-18 22:50:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

…………
什么牌子啊
选国产至少也选天根啦~~~
3楼2008-12-18 23:40:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

天根也不是国产的啊 建议你在加水洗脱前 在超净台上吹30min 应该就可以去除乙醇
4楼2008-12-19 17:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

天根就是国产的
我知道很多人会把天根和QIAGEN混起来
完全不同档次的货……
5楼2008-12-19 17:23:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

figo.339

木虫 (著名写手)

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
洗脱前放置时间太少了,应该20分钟左右,以彻底晾干酒精
6楼2008-12-19 20:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

用好一点的试剂盒完全不用考虑这些问题………………
关键技术就是:
溶胶液是否能够保护DNA,是否能够保证凝胶彻底解体,QIAGEN的溶胶液就算放4度也能自发溶胶,不用加热
还有就是膜结合能力和特异性的技术
7楼2008-12-19 23:36:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlcccs

木虫 (正式写手)

有点意思
8楼2008-12-21 19:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bone0611

可能是乙醇没吹干净,还有漂洗液加酒精的量是否正确
9楼2008-12-28 23:05:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

放置通风橱就可以了,不需要离心,乙醇挥发的很快的,之前可以先用微量的移液器吸一下。
PCR产物在任何溶剂里边都不能长期保存,很容易讲解的,建议不要长期保存,更不用说在乙醇里了
会当凌绝顶,一览众山小
10楼2008-12-28 23:34:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xtmgah31 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯,如何抉择 +10 Isak0320 2026-10-12 14/700 2026-10-14 11:39 by thegarfield
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了,离AI做有机合成还有多远? +8 wangyl_123 2026-10-10 12/600 2026-10-13 20:40 by Merryya
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么? +4 好运来~9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费,对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷!
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬,路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些? +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
请填处理意见