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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 关于植物rna提取
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changlinxy

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于植物rna提取 已有1人参与

求大神帮我看看这张胶图的问题，提的杨树RNA，只跑了最右边一个样，不知道为什么会拖尾，加样加了2微，感觉还是浓度高，太亮了，所以调的有点暗，想知道怎么解决这种拖尾的问题，跑出那种只有单纯RNA的干净条带？

关于植物rna提取
2017-2-17提rna检测2.JPG
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ibelieveicanfly
1楼 2017-02-17 16:51:02
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Tc148

新虫 (初入文坛)
1.仔细操作，防止降解。2.注意取材，如果没有特别要求的话，尽量取幼嫩组织

发自小木虫IOS客户端
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4楼2018-08-27 14:57:35
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Thriving_

新虫 (初入文坛)
降解了

发自小木虫Android客户端
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2楼2018-08-10 16:03:03
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Cgiven

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

PCR拖带产生原因有很多，不知道楼主属于哪一种：
1、退火温度较低，可以提高2到3度
2、Mg离子浓度一般的PCR在1.5mM就可以了，不知楼主用的多少
3、模板浓度较高或者含有其他PCR抑制剂，建议稀释下模板
4、延伸时间一般1kb/min，时间太短可能会延伸不完全
5、循环数太高也可能引起拖带，考虑平台期，31循环应该足够了
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3楼2018-08-25 17:45:16
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