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changlinxy

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于植物rna提取 已有1人参与

求大神帮我看看这张胶图的问题,提的杨树RNA,只跑了最右边一个样,不知道为什么会拖尾,加样加了2微,感觉还是浓度高,太亮了,所以调的有点暗,想知道怎么解决这种拖尾的问题,跑出那种只有单纯RNA的干净条带?

关于植物rna提取
2017-2-17提rna检测2.JPG
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ibelieveicanfly
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Thriving_

新虫 (初入文坛)

2楼2018-08-10 16:03:03
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Cgiven

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

PCR拖带产生原因有很多,不知道楼主属于哪一种:
1、退火温度较低,可以提高2到3度
2、Mg离子浓度一般的PCR在1.5mM就可以了,不知楼主用的多少
3、模板浓度较高或者含有其他PCR抑制剂,建议稀释下模板
4、延伸时间一般1kb/min,时间太短可能会延伸不完全
5、循环数太高也可能引起拖带,考虑平台期,31循环应该足够了
3楼2018-08-25 17:45:16
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Tc148

新虫 (初入文坛)

1.仔细操作,防止降解。2.注意取材,如果没有特别要求的话,尽量取幼嫩组织

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-08-27 14:57:35
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