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liqihenzhao

新虫 (初入文坛)

[求助] RIP实验求助

求助各位童鞋，我最近买了两盒 Millipore Magna RIP™ kit，打算做RIP-seq。
但是这个裂解细胞的量拿不准，因为我用的是拟南芥原生质体表达蛋白，如果像说明书上写的那样一个反应对应2X107个细胞，这么多原生质体离心后在EP管里面有很大一块，体积都有200-300ul，感觉加100ul裂解液不够啊？
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1楼 2017-02-16 15:43:55
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匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
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2楼2017-02-16 22:44:52
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wusofa

金虫 (小有名气)

蛋白RNA相互作用研究
裂解液的量主要还是根据细胞沉淀量加的，本人做了几年RIP了，欢迎交流
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3楼2017-04-16 18:38:04
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Yxijaier

铜虫 (小有名气)
这个试剂盒难道不是做细胞的
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提供专业级ChIP-seq、ATAC-seq、MeRIP-seq、RIP-seq等表观技术服务
4楼2018-06-18 21:01:09
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pooh_cat

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wusofa at 2017-04-16 18:38:04
裂解液的量主要还是根据细胞沉淀量加的，本人做了几年RIP了，欢迎交流

请问裂解产物离心后上清很粘稠是为什么啊？还能用来后续的磁珠沉淀嘛？我用的MERCK 17-701试剂盒
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5楼2021-01-30 22:11:23
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残留躯壳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wusofa at 2017-04-16 18:38:04
裂解液的量主要还是根据细胞沉淀量加的，本人做了几年RIP了，欢迎交流

我最近做组织样本中的RIP，qPCR发现input中目的基因的CT值到30了，请问怎么改进呀？谢谢！
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卧薪藏胆，三千越甲可吞吴
6楼2021-09-30 09:38:49
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