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liqihenzhao

新虫 (初入文坛)

[求助] RIP实验求助

求助各位童鞋,我最近买了两盒 Millipore Magna RIP™ kit,打算做RIP-seq。
但是这个裂解细胞的量拿不准,因为我用的是拟南芥原生质体表达蛋白,如果像说明书上写的那样一个反应对应2X107个细胞,这么多原生质体离心后在EP管里面有很大一块,体积都有200-300ul,感觉加100ul裂解液不够啊?
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匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
2楼2017-02-16 22:44:52
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wusofa

金虫 (小有名气)

蛋白RNA相互作用研究

裂解液的量主要还是根据细胞沉淀量加的,本人做了几年RIP了,欢迎交流
3楼2017-04-16 18:38:04
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Yxijaier

铜虫 (小有名气)

这个试剂盒难道不是做细胞的
提供专业级ChIP-seq、ATAC-seq、MeRIP-seq、RIP-seq等表观技术服务
4楼2018-06-18 21:01:09
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pooh_cat

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wusofa at 2017-04-16 18:38:04
裂解液的量主要还是根据细胞沉淀量加的,本人做了几年RIP了,欢迎交流

请问裂解产物离心后上清很粘稠是为什么啊?还能用来后续的磁珠沉淀嘛?我用的MERCK 17-701试剂盒
5楼2021-01-30 22:11:23
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残留躯壳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wusofa at 2017-04-16 18:38:04
裂解液的量主要还是根据细胞沉淀量加的,本人做了几年RIP了,欢迎交流

我最近做组织样本中的RIP,qPCR发现input中目的基因的CT值到30了,请问怎么改进呀?谢谢!
卧薪藏胆,三千越甲可吞吴
6楼2021-09-30 09:38:49
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