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1311348845

新虫 (小有名气)

[求助] 液相标准曲线 已有6人参与

做的液相标准曲线浓度分别为0.005,0.01,0.02,0.05,0.1,0.5mg/ml,进样量20ul保留时间从开始最小浓度的4.487min到最后大浓度的3.927min这样正确吗?求大神指导

@鸭绿江畔 @klicking 发自小木虫IOS客户端
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chjm1016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种情况有一种是色谱柱的柱容量太小有关,先排除机器的稳定性问题(同一个浓度多次进样看保留时间变化),如果同一浓度的保留时间一致,看看色谱柱是不是用久了脏了,导致柱容量下降。如果同一浓度的保留时间都不稳定,则应该是机器硬件或梯度程序设置不合适。
4楼2017-02-16 08:50:40
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chjm1016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 1311348845 at 2017-02-16 18:12:31
仪器没有漏夜,同一浓度连续进样时间也没有漂移很大,怎么看柱子有没有塌陷?今天减小进样量还是有漂移。
...

同一浓度连续进样没有漂移很大但还是有漂移吗?漂移是往同一方向吗?如果是同一方向,检查梯度设置是否合理,是否梯度上去后有给充足的时间恢复到起始梯度。如果梯度没有问题,建议换个柱子试试看。
8楼2017-02-17 15:32:24
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普通回帖

chengchris

木虫 (正式写手)

微信chengweichris

这样不对,调整色素方法,比如流动相组成

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一定要努力
2楼2017-02-16 06:59:17
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1311348845

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chengchris at 2017-02-16 06:59:17
这样不对,调整色素方法,比如流动相组成

我的流动相现在就是水和乙腈里面各加了0.1%的甲酸,然后用的梯度洗脱,应该加什么呢,一般性保留时间相差多少合里呢?求指导,谢谢

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3楼2017-02-16 08:04:41
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1311348845

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chjm1016 at 2017-02-16 08:50:40
这种情况有一种是色谱柱的柱容量太小有关,先排除机器的稳定性问题(同一个浓度多次进样看保留时间变化),如果同一浓度的保留时间一致,看看色谱柱是不是用久了脏了,导致柱容量下降。如果同一浓度的保留时间都不稳 ...

我试下减小进样量看看,谢谢

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5楼2017-02-16 11:15:47
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先先看下仪器是否漏液吧 这个是最常造成RT飘移的原因,如果仪器没有漏液那就从柱子开始找起 看看是否是柱子有塌陷,排除以上在看看是否是流动相组成有不合理
6楼2017-02-16 11:47:36
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1311348845

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by llw1986 at 2017-02-16 11:47:36
首先先看下仪器是否漏液吧 这个是最常造成RT飘移的原因,如果仪器没有漏液那就从柱子开始找起 看看是否是柱子有塌陷,排除以上在看看是否是流动相组成有不合理

仪器没有漏夜,同一浓度连续进样时间也没有漂移很大,怎么看柱子有没有塌陷?今天减小进样量还是有漂移。

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7楼2017-02-16 18:12:31
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生之华年

金虫 (小有名气)

城市牛马达人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你应该确认一下你的标准曲线的溶质是不是用的同一浓度的有机相,最好的方法是用流动相来稀释你的标曲。
***&¥¥¥
9楼2017-02-18 15:10:09
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llx5262187

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2017-02-18 21:00:09
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