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lindanana新虫 (著名写手)
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蛋白脱盐问题 已有6人参与
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现有约4 mg糖蛋白（分子量55 kD）的含盐溶液150 mL，溶液体系是2XSDS蛋白电泳缓冲液（即50 mM的Tris、384 mM的甘氨酸、7.34 mM的SDS），想要除盐且尽量减少糖蛋白的损失，活性暂且不考虑，应该用什么方法呢？本人已用过C18 SPE小柱和超滤离心管（截留分子量30 kD），发现效果很差，原因可能是脱盐前先用蛋白旋转浓缩仪进行了浓缩（浓缩温度60度，时间长达一天，浓缩至4毫升左右，发现溶液颜色由无色变为浅绿色），导致有大量的盐析出，再跑电泳时发现条带变很浅甚至消失了，所以超滤离心除盐这条路走不通了；然后又试了试浓缩一段时间（浓缩体积至20 mL），在盐析出前进行C18小柱蛋白脱盐，发现脱盐前有的条带脱盐后又没了，不知道什么原因。 请问各位大神，该怎么脱盐并且进行浓缩呢，可不可以用透析试试，会造成蛋白大的损失吗？谢谢！ |
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lindanana
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