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药物在鼠肝微粒体体系中，不反应，峰面积反而增加了一倍 已有4人参与
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最近在做一个化学物质在大鼠肝脏微粒体的代谢实验，出现了一个很神奇的现象，就是物质加入肝微粒体后直接加乙腈沉淀蛋白后，进高效液相分析发现，物质的峰面积比相同浓度下的物质峰大了一倍！这根本都不符合常理，首先操作应该是没问题的，我重复过好几天，后来让一个博士师姐看我操作的，操作没问题。 由于物质加到微粒体孵育体系中，发现物质并没有代谢，反而面积增大一倍，然后为了找出这个问题的原因，我已经排除了NADPH、PBS、蛋白微粒体、乙腈的原因，最后发现单独测物质的峰面积为400出峰时间为9.3，单独测孵育体系峰面积为0，物质加到孵育体系中，不反应直接加乙腈沉淀蛋白，峰面积为700出峰时间为8.5，峰发生了前移，峰面积扩大了一倍。这究竟是什么原因？？哪位大神能给指点一二？拜托了！跪求！！！！ |
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llw1986
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5楼2017-01-24 16:14:31
llw1986
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【答案】应助回帖
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小小丫头爱: 金币+20, ★★★很有帮助 2017-01-24 14:35:48
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| 楼主你的意思是不是说当你直接测neat溶液的时候峰面积为400， RT为9.3，而当把待测物加入到LM体系中而不加NADPH直接终止反应这时候测到的峰面积为700是不是这个样子？那我有两点问题问下第一就是你这个化合物的溶解度怎么样？如果溶解度不是很好的话你这个就可以解释为微粒体对化合物的溶解度有一定的帮助加进去后又溶解了一些所以造成你这个现象。第二个问题就是你有没有确定你仪器的状态是不是有哪里漏液或者定量环或者进样针有堵塞的地方造成吸样不准确呢？我做微粒体稳定性的时候有遇到过不代谢反而增多的现象，不知道你遇到过没有，希望能一起交流下。 |
2楼2017-01-22 16:45:27
zw0123456789zw
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