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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助Western blotting问题
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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)

[交流] 求助Western blotting问题

新手：做Western blotting的时候，蛋白不是已经变性了吗，也就是是说蛋白的结构已经被破坏开了，那么为什么还可以经过转膜以后跟抗体结合呢？谁给我指点一下啊？？？？？急啊！！
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1楼 2008-12-14 23:07:52
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weidong3.14

木虫 (正式写手)
蛋白的免疫活性没有变。
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仰天大笑出门去，我辈岂是蓬蒿人
2楼2008-12-15 01:26:28
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qfzhang

银虫 (小有名气)
表位分线性表位和空间表位两种，所以会产生能ip不能western的现象。
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3楼2008-12-15 10:12:35
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qfzhang

银虫 (小有名气)
★
肖翔(金币+1,VIP+0):可否详细点
线性表位基于氨基酸的序列，空间表位基于蛋白的空间结构
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4楼2008-12-15 10:14:08
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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)
能不能详细一点啊？  qfzhang  铜虫
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5楼2008-12-15 19:37:14
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qfzhang

银虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
抗原抗体的识别，抗体识别抗原的时候，对蛋白而言有两种情况，一种是识别氨基酸序列，一般为4-6个氨基酸序列就可以构成一个识别的表位。另外一种情况是识别蛋白特异的空间结构，在这种情况下，就会产生你说的情况，变性后抗体没有办法识别抗原了。
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6楼2008-12-16 09:53:36
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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by qfzhang at 2008-12-16 09:53:
抗原抗体的识别，抗体识别抗原的时候，对蛋白而言有两种情况，一种是识别氨基酸序列，一般为4-6个氨基酸序列就可以构成一个识别的表位。另外一种情况是识别蛋白特异的空间结构，在这种情况下，就会产生你说的情况 ...

那也就是说只有满足第一种情况的蛋白才可以做Weatern了
那么做之前，你又是怎么知道某种蛋白究竟属于那一种呢？
是不是得尝试啊！！
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7楼2008-12-17 21:15:48
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qfzhang

银虫 (小有名气)
★
肖翔(金币+1,VIP+0):Good!!
实践是检验真理的唯一标准
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8楼2008-12-18 10:08:51
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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by qfzhang at 2008-12-18 10:08:
实践是检验真理的唯一标准

Thank you !!!
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9楼2008-12-18 21:16:05
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