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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)

[交流] 求助Western blotting问题

新手:做Western blotting的时候,蛋白不是已经变性了吗,也就是是说蛋白的结构已经被破坏开了,那么为什么还可以经过转膜以后跟抗体结合呢?谁给我指点一下啊?????急啊!!
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weidong3.14

木虫 (正式写手)

蛋白的免疫活性没有变。
仰天大笑出门去,我辈岂是蓬蒿人
2楼2008-12-15 01:26:28
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qfzhang

银虫 (小有名气)

表位分线性表位和空间表位两种,所以会产生能ip不能western的现象。
3楼2008-12-15 10:12:35
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qfzhang

银虫 (小有名气)

★
肖翔(金币+1,VIP+0):可否详细点
线性表位基于氨基酸的序列,空间表位基于蛋白的空间结构
4楼2008-12-15 10:14:08
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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)

能不能详细一点啊?  qfzhang  铜虫
5楼2008-12-15 19:37:14
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qfzhang

银虫 (小有名气)

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
抗原抗体的识别,抗体识别抗原的时候,对蛋白而言有两种情况,一种是识别氨基酸序列,一般为4-6个氨基酸序列就可以构成一个识别的表位。另外一种情况是识别蛋白特异的空间结构,在这种情况下,就会产生你说的情况,变性后抗体没有办法识别抗原了。
6楼2008-12-16 09:53:36
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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by qfzhang at 2008-12-16 09:53:
抗原抗体的识别,抗体识别抗原的时候,对蛋白而言有两种情况,一种是识别氨基酸序列,一般为4-6个氨基酸序列就可以构成一个识别的表位。另外一种情况是识别蛋白特异的空间结构,在这种情况下,就会产生你说的情况 ...

那也就是说只有满足第一种情况的蛋白才可以做Weatern了
那么做之前,你又是怎么知道某种蛋白究竟属于那一种呢?
是不是得尝试啊!!
7楼2008-12-17 21:15:48
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qfzhang

银虫 (小有名气)

★
肖翔(金币+1,VIP+0):Good!!
实践是检验真理的唯一标准
8楼2008-12-18 10:08:51
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肖翔

铁杆木虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by qfzhang at 2008-12-18 10:08:
实践是检验真理的唯一标准

Thank you !!!
9楼2008-12-18 21:16:05
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