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α-葡萄苷酶抑制实验,阳性对照组的抑制率低,啥情况?
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加入0.1mol/L、2mL的缓冲盐溶液,加待测提取液0.1mL与底物PNPG(2mmol/L,0.1mL)混合,充分振荡,37度水浴10min,加入α-葡萄糖苷酶(0.1U/mL,1mL),于37度反应20min,加入1mL,0.5mol/L碳酸钠终止反应,于400nm处测吸光度。 空白组(加酶、pnpg、碳酸钠、缓冲液) 空白对照组(pnpg、碳酸钠、缓冲液) 样品组(加酶、pnpg、碳酸钠、缓冲液、样品) 背景对照组(pnpg、碳酸钠、缓冲液、样品) 抑制率=1-(样品组-背景对照组)/(空白组-空白对照组) 1、按照样品同一浓度换算抑制率,发现阳性对照组抑制率最低。 2、用紫外测的,吸光度在0.2-0.8之间,部分样品吸光度在1左右,具体应该在什么范围才是有效的? 3、之前酶液用的是0.6ml,当加到1ml时,样品、阳性对照、空白吸光度均降低,这是怎么回事? 发自小木虫Android客户端 |
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