24小时热门版块排行榜    

查看: 2005  |  回复: 11

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师,您好!我是初入生物实验室,刚开始做细胞实验。我养的HF... 已有1人参与

老师,您好!我是初入生物实验室,刚开始做细胞实验。我养的HFF细胞和人脐带血细胞长不起来,状态也不是很好。HFF细胞用的培养基是1640,人脐带血细胞的是DMEM,都含有10%血清。请问老师,细胞长得慢,可能是什么原因,有什么建议 @gyesang

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

张金猪

新虫 (初入文坛)

你好,我也是去年才入门,到现在吸收了一些经验教训,希望能帮到你。我觉得长得慢可能跟你seeding的细胞密度有关,还有你用的是什么血清,培养过程中是否有contamination,或者还可能你手里的细胞本身就不太好。建议可以先看看细胞培养的书。个人拙见,希望不要嫌弃。

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-01-18 01:06:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 紫凝玲雨 at 2017-01-18 14:21:10
你可以加大那个培养基的密度,10ml的培养基中加入1.5ml的细胞悬混液,或者你消化细胞的时候,不用胰酶,看看行不行

不用胰酶的话,吹打不下来

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-01-18 15:03:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cho-123

新虫 (小有名气)

细胞状态不好的原因有很多:第一,传代动作过于粗暴(消化过度,吹打过度):第二,细胞传代后不要总是拿出来看,密度也应该大一些:第三,建议传代第二天换液。ps,不知道你具体怎么传代

发自小木虫IOS客户端
8楼2017-01-21 18:01:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

紫凝玲雨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以加大那个培养基的密度,10ml的培养基中加入1.5ml的细胞悬混液,或者你消化细胞的时候,不用胰酶,看看行不行

发自小木虫Android客户端
3楼2017-01-18 14:21:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张金猪 at 2017-01-18 01:06:39
你好,我也是去年才入门,到现在吸收了一些经验教训,希望能帮到你。我觉得长得慢可能跟你seeding的细胞密度有关,还有你用的是什么血清,培养过程中是否有contamination,或者还可能你手里的细胞本身就不太好。建议 ...

传代是按1:4传的,第一次传代长得还可以,第二次传代就长得慢了。血清是南美的。培养过程没有污染。感谢帮助与建议

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-01-18 15:02:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫凝玲雨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by LYF_feng at 2017-01-18 15:03:40
不用胰酶的话,吹打不下来
...

那你可以缩短消化时间,普通细胞不是消化3分钟吗,那你消化1分钟,或者1.5分钟这样试试,因为细胞不好养的话,消化时间太长了对细胞不好

发自小木虫Android客户端
6楼2017-01-18 18:10:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 紫凝玲雨 at 2017-01-18 18:10:09
那你可以缩短消化时间,普通细胞不是消化3分钟吗,那你消化1分钟,或者1.5分钟这样试试,因为细胞不好养的话,消化时间太长了对细胞不好
...

好的,谢谢你的建议

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-01-18 18:41:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoegg

金虫 (初入文坛)

我科室养HFF细胞用10%FBS+DMEM+1%单抗,0.25%胰酶消化30s,800转离心5min.只要原代细胞没问题,其它就没什么。要是想长得快,加大细胞量就好。我基本是一瓶T25传10瓶T25。

发自小木虫Android客户端
9楼2017-01-22 11:09:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物公司

新虫 (初入文坛)

内容已删除
10楼2017-02-28 22:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LYF_feng 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:39 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:03 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:51 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:15 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:39 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-18 7/350 2026-09-19 21:03 by 9i7PCSZyMzot
[教师之家] 现代”学阀”该如何界定 +3 iaeyuan 2026-09-19 3/150 2026-09-19 20:52 by 没昵称呀
[基金申请] 国社科系统bug了,是不是要放榜了? +7 kynobel 2026-09-16 9/450 2026-09-19 14:52 by 接好运婷
[有机交流] 各位大神,目前国内有哪些比较好用的逆合成软件? 20+3 zapen 2026-09-15 9/450 2026-09-18 18:17 by zapen
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组|2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
信息提示
请填处理意见