24小时热门版块排行榜    

查看: 1959  |  回复: 11

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师,您好!我是初入生物实验室,刚开始做细胞实验。我养的HF... 已有1人参与

老师,您好!我是初入生物实验室,刚开始做细胞实验。我养的HFF细胞和人脐带血细胞长不起来,状态也不是很好。HFF细胞用的培养基是1640,人脐带血细胞的是DMEM,都含有10%血清。请问老师,细胞长得慢,可能是什么原因,有什么建议 @gyesang

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

张金猪

新虫 (初入文坛)

你好,我也是去年才入门,到现在吸收了一些经验教训,希望能帮到你。我觉得长得慢可能跟你seeding的细胞密度有关,还有你用的是什么血清,培养过程中是否有contamination,或者还可能你手里的细胞本身就不太好。建议可以先看看细胞培养的书。个人拙见,希望不要嫌弃。

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-01-18 01:06:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 紫凝玲雨 at 2017-01-18 14:21:10
你可以加大那个培养基的密度,10ml的培养基中加入1.5ml的细胞悬混液,或者你消化细胞的时候,不用胰酶,看看行不行

不用胰酶的话,吹打不下来

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-01-18 15:03:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cho-123

新虫 (小有名气)

细胞状态不好的原因有很多:第一,传代动作过于粗暴(消化过度,吹打过度):第二,细胞传代后不要总是拿出来看,密度也应该大一些:第三,建议传代第二天换液。ps,不知道你具体怎么传代

发自小木虫IOS客户端
8楼2017-01-21 18:01:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

紫凝玲雨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以加大那个培养基的密度,10ml的培养基中加入1.5ml的细胞悬混液,或者你消化细胞的时候,不用胰酶,看看行不行

发自小木虫Android客户端
3楼2017-01-18 14:21:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张金猪 at 2017-01-18 01:06:39
你好,我也是去年才入门,到现在吸收了一些经验教训,希望能帮到你。我觉得长得慢可能跟你seeding的细胞密度有关,还有你用的是什么血清,培养过程中是否有contamination,或者还可能你手里的细胞本身就不太好。建议 ...

传代是按1:4传的,第一次传代长得还可以,第二次传代就长得慢了。血清是南美的。培养过程没有污染。感谢帮助与建议

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-01-18 15:02:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫凝玲雨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by LYF_feng at 2017-01-18 15:03:40
不用胰酶的话,吹打不下来
...

那你可以缩短消化时间,普通细胞不是消化3分钟吗,那你消化1分钟,或者1.5分钟这样试试,因为细胞不好养的话,消化时间太长了对细胞不好

发自小木虫Android客户端
6楼2017-01-18 18:10:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYF_feng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 紫凝玲雨 at 2017-01-18 18:10:09
那你可以缩短消化时间,普通细胞不是消化3分钟吗,那你消化1分钟,或者1.5分钟这样试试,因为细胞不好养的话,消化时间太长了对细胞不好
...

好的,谢谢你的建议

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-01-18 18:41:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoegg

金虫 (初入文坛)

我科室养HFF细胞用10%FBS+DMEM+1%单抗,0.25%胰酶消化30s,800转离心5min.只要原代细胞没问题,其它就没什么。要是想长得快,加大细胞量就好。我基本是一瓶T25传10瓶T25。

发自小木虫Android客户端
9楼2017-01-22 11:09:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物公司

新虫 (初入文坛)

内容已删除
10楼2017-02-28 22:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LYF_feng 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +9 majunge000 2026-08-11 11/550 2026-08-15 23:20 by botar
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见