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【求助】如何观察细胞在材料上的生长情况
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朋友们：我做的是细胞在厚度为2毫米的钛片上的生长情况，材料不透光想问一下大家如何观察细胞在材料上的形态？ 1、用扫描电镜的话，如何固定细胞?有什么注意的细节？扫描电镜比较贵，我想一次成功，所以请做过的同学，给点建议！ 2、用激光共聚焦的话可以嘛？ 谢谢！ [ Last edited by zhangwj on 2008-12-14 at 11:16 ] |
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用SEM观察细胞在材料表面生长的详细实验步骤
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wgcui(金币+2,VIP+0):欢迎多多评论！ 3-17 09:42
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SEM（细胞粘附）实验方法： 1．细胞接种到材料上； 2．4,7,（3,5）天取样； 3．吸弃原有培养基； 4．加入1mLPBS培养基吹洗材料* 3次（长在材料表面的细胞不会掉） 5．吸弃PBS加入2.5-3.0% 戊二醛（固定2.5－3h）； 6．吸弃戊二醛,30%,50%,75%,80%,95%,100%(两次)梯度乙醇脱水（15min/次）； 7．在玻璃瓶中乙酸异戊酯替换（大于30min）； 8．临界点干燥后送扫描电镜观察。 SEM试验注意事项： 1.戊二醛现配现用； 2.用乙酸异戊酯替换时必须使用玻璃瓶； ########特别要注意的是，在处理的过程中材料常常会翻面，一定要记住你的细胞长在材料的哪一面，最好把材料做成特殊的形状，做好记录，观察的时候才不会浪费时间和金钱。 |
16楼2009-03-17 09:22:48
hhjie
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2楼2008-12-14 09:02:19
yinmin9521
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