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laimin15

无虫 (小有名气)

[交流] 【求助】如何观察细胞在材料上的生长情况

朋友们:我做的是细胞在厚度为2毫米的钛片上的生长情况,材料不透光想问一下大家如何观察细胞在材料上的形态?
     1、用扫描电镜的话,如何固定细胞?有什么注意的细节?扫描电镜比较贵,我想一次成功,所以请做过的同学,给点建议!
     2、用激光共聚焦的话可以嘛?
谢谢!

[ Last edited by zhangwj on 2008-12-14 at 11:16 ]
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imrxxxu

金虫 (正式写手)

★ ★
zhangwj(金币+2):谢谢参与交流! 1-17 11:20
引用回帖:
Originally posted by whn732 at 2009-1-13 19:20:



固定之前要使用PBS冲洗材料吧?这一步的把握是不是很重要,会不会把细胞冲掉啊?
另外对于干燥方法,有文献说冷冻干燥也可以,不知道效果比临界点干燥好吗?

楼主是在钛片上养细胞,没猜错的话应该是成骨类细胞,这类细胞的贴壁不错,通常不会冲掉。
另外,没有超临界干燥设备时,冷冻或乙腈干燥效果也都可以,看个人手法吧。
ps:所谓的冲洗我理解应该叫漂洗比较合适,我一般在吸掉培养液后,培养板中加适量PBS,轻轻晃动一下(有时也不晃),弃掉PBS,重复2-3遍即可,贴壁细胞是不会损失的。
14楼2009-01-17 11:01:35
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hhjie

木虫 (小有名气)


sunbuct(金币+1,VIP+0):感谢应助!
先用戊二痊固定,再用梯度酒精脱水干燥,然后就可以做SEM了。
激光共聚焦不了解。
看文献啊,上面都有说明。
2楼2008-12-14 09:02:19
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yinmin9521

铁杆木虫 (著名写手)

扫描电镜、荧光显微镜都可以。
3楼2008-12-14 10:06:08
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laimin15

无虫 (小有名气)

荧光显微镜透光嘛?
4楼2008-12-14 10:09:19
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