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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 【求助】如何观察细胞在材料上的生长情况
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laimin15

无虫 (小有名气)

[交流] 【求助】如何观察细胞在材料上的生长情况

朋友们：我做的是细胞在厚度为2毫米的钛片上的生长情况，材料不透光想问一下大家如何观察细胞在材料上的形态？
     1、用扫描电镜的话，如何固定细胞?有什么注意的细节？扫描电镜比较贵，我想一次成功，所以请做过的同学，给点建议！
     2、用激光共聚焦的话可以嘛？
谢谢！

[ Last edited by zhangwj on 2008-12-14 at 11:16 ]
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1楼 2008-12-14 08:57:29
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imrxxxu

金虫 (正式写手)
★ ★
zhangwj(金币+2):谢谢参与交流！ 1-17 11:20
引用回帖:
Originally posted by whn732 at 2009-1-13 19:20:



固定之前要使用PBS冲洗材料吧？这一步的把握是不是很重要，会不会把细胞冲掉啊？
另外对于干燥方法，有文献说冷冻干燥也可以，不知道效果比临界点干燥好吗？

楼主是在钛片上养细胞，没猜错的话应该是成骨类细胞，这类细胞的贴壁不错，通常不会冲掉。
另外，没有超临界干燥设备时，冷冻或乙腈干燥效果也都可以，看个人手法吧。
ps：所谓的冲洗我理解应该叫漂洗比较合适，我一般在吸掉培养液后，培养板中加适量PBS，轻轻晃动一下（有时也不晃），弃掉PBS，重复2-3遍即可，贴壁细胞是不会损失的。
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14楼2009-01-17 11:01:35
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hhjie

木虫 (小有名气)
★
sunbuct(金币+1,VIP+0):感谢应助！
先用戊二痊固定，再用梯度酒精脱水干燥，然后就可以做SEM了。
激光共聚焦不了解。
看文献啊，上面都有说明。
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2楼2008-12-14 09:02:19
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yinmin9521

铁杆木虫 (著名写手)
扫描电镜、荧光显微镜都可以。
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3楼2008-12-14 10:06:08
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laimin15

无虫 (小有名气)
荧光显微镜透光嘛？
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4楼2008-12-14 10:09:19
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