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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR用试剂盒做做实时荧光PCR阴性总是有污染。。。求助
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yuer_

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-17 13:07:59
可能试剂污染，有些牌子的试剂就是不好
PCR的污染物无非就是DNA模板，你认为酒精可以灭活DNA吗？

也是没办法 条件简陋啊。除了酒精擦拭台面之类的也只能照照紫外了 我这里通风还不好也不太敢用次氯酸钠擦拭台面之类的 味道太大
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11楼2017-01-18 09:30:40
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yuer_

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by 许彦 at 2017-01-17 16:38:26
你是做的临床样本吗？扩增产物是否开盖过？方便透露下是什么厂家吗？

用的是达安的HBV试剂
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12楼2017-01-18 09:31:29
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yuer_

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
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7楼: Originally posted by 足下客 at 2017-01-17 13:49:16
1、HBV荧光PCR检测是很容易出现污染的，操作的时候要非常谨慎。而且环境中如果存在污染是很难去除的。估计你的操作也是有问题的。你把阴性血清和高浓度的标准品一起准备，是很容易把阴性血清污染到的。
2、我以前提 ...

谢谢你 不过我这里确实没用次氯酸钠擦拭台面 因为实验室完全不通风，次氯酸钠味道闷一晚上就待不了人了 要好久才能散味道 我现在已经把阴性和阳性标准品完全分开处理和加样了 就这样还是有阴性污染。改天试下你说的次氯酸钠擦拭
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13楼2017-01-18 09:36:54
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yuer_

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by 许彦 at 2017-01-17 16:39:23
可以做个空白对照，不加样本看看，有可能是试剂本身质量问题？

你的意思是只做阴性吗？
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14楼2017-01-18 09:38:07
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yuer_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 许彦 at 2017-01-17 16:39:23
可以做个空白对照，不加样本看看，有可能是试剂本身质量问题？

你的意思是不加样本的空白？那和我做纯水的空白对照是不是一个意思？
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15楼2017-01-18 10:55:52
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许彦

木虫 (正式写手)
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15楼: Originally posted by yuer_ at 2017-01-18 10:55:52
你的意思是不加样本的空白？那和我做纯水的空白对照是不是一个意思？...

您是哪个医院的，我给你提供达安技术支持的电话。

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16楼2017-01-18 11:36:40
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许彦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by yuer_ at 2017-01-18 10:55:52
你的意思是不加样本的空白？那和我做纯水的空白对照是不是一个意思？...

如果是环境污染了，纯水也有问题，

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17楼2017-01-18 11:37:09
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