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新虫 (小有名气)

[求助] 6 × His标记蛋白定量 已有1人参与

本人使用真核细胞质粒表达载体表达一个目的蛋白,由于没有一抗可以使用,所以在目的蛋白末端加了6×His,现在需要对这个蛋白进行定量检测,使用WB的话定量结果又不太可信,想用ELISA试剂盒检测,但是找不到His的定量试剂盒。

度娘上只搜到一个半定量的试剂盒,但是看那个试剂盒说明书感觉不靠谱。附上链接:
http://www.genscript.com.cn/prod ... on-and-purification

哪位前辈有用过?给小弟推荐一个吧
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉好奇怪哈,蛋白质定量干嘛要上一抗或者WB这样的方法呢?蛋白定量自己就很多方法,简单直接,何必那么绕?
3楼2017-01-13 14:55:40
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bush119

木虫 (职业作家)

灌水高手

蛋白定量呗?BCA?
难道说表达量特别低?
2楼2017-01-13 10:05:28
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新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yxncas-2012 at 2017-01-13 14:55:40
感觉好奇怪哈,蛋白质定量干嘛要上一抗或者WB这样的方法呢?蛋白定量自己就很多方法,简单直接,何必那么绕?

不是普通的蛋白,没法纯化。
不是那种双缩脲法能随便计算的
4楼2017-01-13 22:07:30
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1322324659

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bush119 at 2017-01-13 10:05:28
蛋白定量呗?BCA?
难道说表达量特别低?

表达量确实比较低,单位需要计算成 IU/ml。
5楼2017-01-13 22:08:42
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