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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提取质粒电泳后现象奇怪
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MeiPD

新虫 (小有名气)

[求助] 提取质粒电泳后现象奇怪 已有3人参与

1号为空质粒，2号为公司提取的重组质粒，3号为15,000M，4-6为自己提取重组质粒。空质粒大小为8K，插入片段大小400bp，请问出现这种情况是什么原因？M从上到下为15,000、10,000、7500、5000、2500

提取质粒电泳后现象奇怪


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1楼 2017-01-09 17:26:17
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
空载体的大小就不对嘛，单酶切跑胶结果更准。
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2楼2017-01-10 11:19:50
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peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
插入片段只有400bp，你的空质粒和你的重组质粒应该大小差不多大的，你这个很明显不符合呢。你提取的重组质粒大小还有你的空质粒大小都对不上的，你的电泳还有杂带不知道是不是污染了，这个估计需要你自己细查一下了。
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3楼2017-01-10 11:52:11
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MeiPD

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-10 11:19:50
空载体的大小就不对嘛，单酶切跑胶结果更准。

谢谢

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4楼2017-01-11 10:39:38
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MeiPD

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by peitaokong at 2017-01-10 11:52:11
插入片段只有400bp，你的空质粒和你的重组质粒应该大小差不多大的，你这个很明显不符合呢。你提取的重组质粒大小还有你的空质粒大小都对不上的，你的电泳还有杂带不知道是不是污染了，这个估计需要你自己细查一下了 ...

我空载体也有跟公司送过来的空载体一起跑过琼脂糖，结果条带是一致的

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5楼2017-01-11 10:41:07
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接跑质粒的话会出现3条带的，最亮的那条也不是线性条带，比对大小的话不准确~
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···
6楼2017-01-11 12:53:28
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