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beanmilk金虫 (小有名气)
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[求助]
求助western blot，急急急 已有1人参与
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一个55kDa的目的蛋白，以GAPDH作为内参，但是样品A曝光的时候内参和目的蛋白都没有，样品B曝光的时候有内参和目的条带，但是内参特别浅。两个样品都是一起做的实验。不知道为什么会这样？这两次是新提取的蛋白，之前做的几次GAPDH的条带很清晰，目的条带不明显。请各位大神指导一下。 电泳条件是30V，约55min跑浓缩胶，70V，约1h30min跑10%的分离胶。 转膜是湿转。100V，GAPDH转40min，目的条带转60min 一抗：GAPDH是1:500 目的条带是1:1000 二抗：GAPDH 羊抗鼠1:10000 目的条带是羊抗兔1:10000 |
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2楼2017-01-06 14:07:24
beanmilk
金虫 (小有名气)
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3楼2017-01-06 16:36:07