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表达包涵体
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正在表达一个蛋白，最开始用pet29+BL21，表达有包涵体，然后换用origami宿主，破碎后稍微澄清，离心跑胶看过之后目的蛋白量非常少，条带都很难看清，但是有酶活。然后考虑是不是这个蛋白在TriHCI里溶解度太低了，隧往缓冲液里加了5%左右的甘油，结果菌体是很快破开了，但是过了一会稍微变混了一些，但还是透明的，跑胶看了之后，发现目的蛋白条带依然跟以前一样不明显。然后，今天破碎时加了0.5%的吐温20。。结果破碎液始终是浑浊的。。请问有没有碰到类似情况的？要如何是好？为啥加了去污剂居然还是混的。。。 等电点暂时可能没法测，预测是在5点多，我ph7 7.4 8 都用过，现象都差不多。 发自小木虫Android客户端 |
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