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douyaaya

金虫 (小有名气)

[交流] 请问怎样测定蛋白质的OD值

由于样品量少,不适宜用福林酚等测定,所以老板建议直接测OD值,但我不知道怎么测,请各位高手帮忙!
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liubang8355

金虫 (小有名气)

★ ★
asr(金币+2,VIP+0):thanks
1.吸收曲线的绘制:
    用吸量管吸取2mL5.00mg/mL标准蛋白质溶液于10mL比色管中,用0.9% NaCl溶液稀释至刻 度,摇匀。用1cm石英比色皿,以0.9% NaCl溶液为参比,在190 nm~400nm区间,测量吸光度。  
    2. 标准曲线的制作 :
    用吸量管分别吸取0.5、1.0 、1.5、 2.0 、2.5  mL 5.00 mg.mL-1标准蛋白质溶液于5只10 mL 比色管中,用0.9% NaCl溶液稀释至刻度,摇匀。用1 cm石英比色皿,以0.9%NaCl溶液为参比,在280 nm处分别测定各标准溶液的吸光度A278记录所得读数。
3. 样品测定:
     取适量浓度的待测蛋白质溶液3 mL,按上述方法测定278 nm处的吸光度。平行测定三份。
7楼2008-12-11 20:45:00
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douyaaya

金虫 (小有名气)

大家帮帮忙啊,谢谢!
2楼2008-12-11 20:21:52
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liubang8355

金虫 (小有名气)


asr(金币+1,VIP+0):谢谢交流。
OD280紫外检测,可以回收蛋白质的
3楼2008-12-11 20:35:53
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liubang8355

金虫 (小有名气)

网上搜索或者查文献,蛋白质的紫外测定法
5楼2008-12-11 20:36:52
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