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douyaaya

金虫 (小有名气)

[交流] 请问怎样测定蛋白质的OD值

由于样品量少,不适宜用福林酚等测定,所以老板建议直接测OD值,但我不知道怎么测,请各位高手帮忙!
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liubang8355

金虫 (小有名气)

网上搜索或者查文献,蛋白质的紫外测定法
5楼2008-12-11 20:36:52
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查看全部 14 个回答

douyaaya

金虫 (小有名气)

大家帮帮忙啊,谢谢!
2楼2008-12-11 20:21:52
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liubang8355

金虫 (小有名气)

★
asr(金币+1,VIP+0):谢谢交流。
OD280紫外检测,可以回收蛋白质的
3楼2008-12-11 20:35:53
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liubang8355

金虫 (小有名气)

★ ★
asr(金币+2,VIP+0):thanks
大多数蛋白质由于有酷氨酸和色氨酸的存在,在紫外光280nm有吸收高峰,可以进行蛋白质含量的测定。但是核酸在280nm也有吸收,干扰测定,不过核酸的最大吸收峰在260nm,warburg——等测定了酵母烯醇酶和酵母核酸在280nm和260nm时A的比值,然后通过计算消除核酸存在的影响,可以求得有核酸存在时蛋白质的浓度。

1.取待测样品溶液置于光径1cm的石英比色杯中,于751型分光光度计波长280nm和260nm,分别读取A280和A260,用蒸馏水(缓冲溶液或盐溶液,视样品溶液而定)为比色空白对照。

2.根据下列公式计算样品中的蛋白质含量。

蛋白质含量(mg/ml)=1.55A280—0.76A260
6楼2008-12-11 20:40:50
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