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douyaaya金虫 (小有名气)
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[交流]
请问怎样测定蛋白质的OD值
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| 由于样品量少，不适宜用福林酚等测定，所以老板建议直接测OD值，但我不知道怎么测，请各位高手帮忙！ |
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asr(金币+2,VIP+0):thanks
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大多数蛋白质由于有酷氨酸和色氨酸的存在，在紫外光280nm有吸收高峰，可以进行蛋白质含量的测定。但是核酸在280nm也有吸收，干扰测定，不过核酸的最大吸收峰在260nm，warburg——等测定了酵母烯醇酶和酵母核酸在280nm和260nm时A的比值，然后通过计算消除核酸存在的影响，可以求得有核酸存在时蛋白质的浓度。 1．取待测样品溶液置于光径1cm的石英比色杯中，于751型分光光度计波长280nm和260nm，分别读取A280和A260，用蒸馏水（缓冲溶液或盐溶液，视样品溶液而定）为比色空白对照。 2．根据下列公式计算样品中的蛋白质含量。 蛋白质含量（mg/ml）=1.55A280—0.76A260 |
6楼2008-12-11 20:40:50
douyaaya
金虫 (小有名气)
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