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mochenmi

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 已有3人参与

第一次接触原核表达,目的蛋白是真菌核定位的一个蛋白。现在手里有28a载体和DE3菌株,想问问是直接把基因连进去就行了?28a是自带His标签的,如果我想用其他标签怎么办?

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若水空杯

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看一下有没有稀有密码子,有的话就不能直接连,需要优化
每一个不曾起舞的日子,都是对生命的辜负!
3楼2017-01-05 16:51:39
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小静儿000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以用诺唯赞的同源重组试剂盒,我最近在做真核表达,构建载体的时候就是用的这个试剂盒,成功效率很高,而且不需要中间载体,一步完成克隆直接连到你想要连的这个表达载体上,可以在克隆的同时把想用的标签直接构建到重组质粒中,操作简单,比普通克隆快。
2楼2017-01-05 15:06:35
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小静儿000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 若水空杯 at 2017-01-05 16:51:39
看一下有没有稀有密码子,有的话就不能直接连,需要优化

请问什么是稀有密码子?为什么有稀有密码子就不能直接连?怎么优化呢?
4楼2017-01-18 10:29:51
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firefly22

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

5楼2017-01-18 18:29:17
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