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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 原核表达
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mochenmi

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 已有3人参与

第一次接触原核表达，目的蛋白是真菌核定位的一个蛋白。现在手里有28a载体和DE3菌株，想问问是直接把基因连进去就行了？28a是自带His标签的，如果我想用其他标签怎么办？

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1楼 2017-01-04 16:14:48
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若水空杯

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看一下有没有稀有密码子，有的话就不能直接连，需要优化
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每一个不曾起舞的日子，都是对生命的辜负！
3楼2017-01-05 16:51:39
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小静儿000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以用诺唯赞的同源重组试剂盒，我最近在做真核表达，构建载体的时候就是用的这个试剂盒，成功效率很高，而且不需要中间载体，一步完成克隆直接连到你想要连的这个表达载体上，可以在克隆的同时把想用的标签直接构建到重组质粒中，操作简单，比普通克隆快。
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2楼2017-01-05 15:06:35
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小静儿000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 若水空杯 at 2017-01-05 16:51:39
看一下有没有稀有密码子，有的话就不能直接连，需要优化

请问什么是稀有密码子？为什么有稀有密码子就不能直接连？怎么优化呢？
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4楼2017-01-18 10:29:51
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firefly22

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2017-01-18 18:29:17
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