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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 多糖糖含量上不去，求帮忙
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琥珀天千

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by lovely_sindy at 2017-03-22 11:30:58
你样品浓度多少？标准品浓度多少？我们一般标准品浓度0.1mg/ml，样品浓度1mg/ml，然后做的时候样品稀释10倍，就是0.1mg/ml，所以样品浓度和标准品浓度一致。把你测出来的吸光度带入到你的标准曲线里面得出的数据乘 ...

请问楼主用考马斯亮蓝法测蛋白了吗？
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11楼2017-09-12 10:27:42
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

【答案】应助回帖

多糖纯化，用了DEAE和分子筛，纯度依然不高，有这几个原因。一是你离子交换纯化中洗杂不彻底，可以增加洗杂柱体积和时间，洗脱流动相及洗脱方式可以再优化，放缓梯度等洗脱提高分辨率；二是你用排阻介质的时候上样量，柱体积这些也要注意，一般来说，上样体积是柱体积的25%~40%，可以达到较好的分离。祝你顺利。
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12楼2017-09-12 15:51:02
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剑客

木虫 (知名作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lovely_sindy at 2017-03-02 10:56:20
我是用苯酚硫酸法测得。现在也有在线糖含量检测仪，只是我还是老方法。你通过DEAE分离得到的组分可以用液相测一下分子量，然后选择合适的分子筛，你分不开来可能分子筛的分离范围不对。...

你好，用液相测多糖分子量是普通液相还是凝胶色谱啊？另外了解哪里可以测分子量分布么？谢谢

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13楼2017-10-31 01:51:39
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lovely_sindy

新虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by 桑庭vip at 2017-06-07 09:51:26
楼主啊，我的多糖还没有做到你这个步骤也不懂啊，，，希望接下来能向你请教！
请问楼主的deae用哪个厂家啊

不好意思很久没看帖子，用的solarbio 索来宝的

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14楼2017-11-28 23:52:18
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lovely_sindy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 琥珀天千 at 2017-09-12 10:27:42
请问楼主用考马斯亮蓝法测蛋白了吗？...

测过的

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15楼2017-11-28 23:52:35
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lovely_sindy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by walking dead at 2017-09-12 15:51:02
多糖纯化，用了DEAE和分子筛，纯度依然不高，有这几个原因。一是你离子交换纯化中洗杂不彻底，可以增加洗杂柱体积和时间，洗脱流动相及洗脱方式可以再优化，放缓梯度等洗脱提高分辨率；二是你用排阻介质的时候上样量 ...

好的，谢谢你，很棒！

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16楼2017-11-28 23:53:03
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lovely_sindy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 剑客 at 2017-10-31 01:51:39
你好，用液相测多糖分子量是普通液相还是凝胶色谱啊？另外了解哪里可以测分子量分布么？谢谢
...

凝胶色谱用的，你可以把已知分子量的标准品右旋糖苷依次过液相，然后以出峰时间和分子量做图，然后进样品，每个出峰时间带到标准曲线里面就会得到分子量

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17楼2017-11-28 23:55:01
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