【答案】应助回帖

11楼2017-09-12 10:27:42

walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

应助: 40 (小学生)
贵宾: 0.001
金币: 1354.8
散金: 59
红花: 17
帖子: 287
在线: 56.5小时
虫号: 4175016
注册: 2015-10-26
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

多糖纯化，用了DEAE和分子筛，纯度依然不高，有这几个原因。一是你离子交换纯化中洗杂不彻底，可以增加洗杂柱体积和时间，洗脱流动相及洗脱方式可以再优化，放缓梯度等洗脱提高分辨率；二是你用排阻介质的时候上样量，柱体积这些也要注意，一般来说，上样体积是柱体积的25%~40%，可以达到较好的分离。祝你顺利。

12楼2017-09-12 15:51:02

剑客

木虫 (知名作家)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 8351
散金: 18
红花: 24
帖子: 8976
在线: 1677.6小时
虫号: 241009
注册: 2006-04-09
性别: GG
专业: 天然有机化学

引用回帖:

7楼: Originally posted by lovely_sindy at 2017-03-02 10:56:20
我是用苯酚硫酸法测得。现在也有在线糖含量检测仪，只是我还是老方法。你通过DEAE分离得到的组分可以用液相测一下分子量，然后选择合适的分子筛，你分不开来可能分子筛的分离范围不对。...

你好，用液相测多糖分子量是普通液相还是凝胶色谱啊？另外了解哪里可以测分子量分布么？谢谢

发自小木虫IOS客户端

13楼2017-10-31 01:51:39

lovely_sindy

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.8
帖子: 25
在线: 6.3小时
虫号: 3400140
注册: 2014-09-05
专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

10楼: Originally posted by 桑庭vip at 2017-06-07 09:51:26
楼主啊，我的多糖还没有做到你这个步骤也不懂啊，，，希望接下来能向你请教！
请问楼主的deae用哪个厂家啊

不好意思很久没看帖子，用的solarbio 索来宝的

发自小木虫IOS客户端

14楼2017-11-28 23:52:18

lovely_sindy

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.8
帖子: 25
在线: 6.3小时
虫号: 3400140
注册: 2014-09-05
专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

11楼: Originally posted by 琥珀天千 at 2017-09-12 10:27:42
请问楼主用考马斯亮蓝法测蛋白了吗？...

测过的

发自小木虫IOS客户端

15楼2017-11-28 23:52:35

lovely_sindy

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.8
帖子: 25
在线: 6.3小时
虫号: 3400140
注册: 2014-09-05
专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

12楼: Originally posted by walking dead at 2017-09-12 15:51:02
多糖纯化，用了DEAE和分子筛，纯度依然不高，有这几个原因。一是你离子交换纯化中洗杂不彻底，可以增加洗杂柱体积和时间，洗脱流动相及洗脱方式可以再优化，放缓梯度等洗脱提高分辨率；二是你用排阻介质的时候上样量 ...

好的，谢谢你，很棒！

发自小木虫IOS客户端

16楼2017-11-28 23:53:03

lovely_sindy

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.8
帖子: 25
在线: 6.3小时
虫号: 3400140
注册: 2014-09-05
专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

13楼: Originally posted by 剑客 at 2017-10-31 01:51:39
你好，用液相测多糖分子量是普通液相还是凝胶色谱啊？另外了解哪里可以测分子量分布么？谢谢
...

凝胶色谱用的，你可以把已知分子量的标准品右旋糖苷依次过液相，然后以出峰时间和分子量做图，然后进样品，每个出峰时间带到标准曲线里面就会得到分子量

发自小木虫IOS客户端

17楼2017-11-28 23:55:01