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老师，您好，我想问一下制备感受态
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老师，您好，我想问一下制备感受态 @biostar2009 发自小木虫Android客户端 |
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4楼2017-02-22 15:11:53
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采用经典的方法。 1，无菌条件下,挑取冻存于一70℃冰箱的菌种划线接种于不含氨节青霉素的LB琼脂平板上,37℃倒置培养12一16h左右 2，挑取单个菌落,接种于5ml不含氨节青霉素的LB液体培养基中,37℃、,200RPM摇 床培养过夜 3,次日在无菌条件下吸取1ML菌液加入到不含氨节青霉素的lb液体培养基中,37℃、,200RPM 摇床培养,至菌液OD600的值在0.3一0.5之间 4,无菌条件下(以下操作均要求严格无菌且在冰浴中进行),将菌液转移到用冰预冷过的 无菌离心管中,冰浴15min,使培养物冷却至0℃ 5,4℃、,4000RPM离心,轻轻倒掉上清,回收沉淀,加入10ml冰预冷的 0.1mol/LCaCl2溶液重悬沉淀,冰浴10ml务必放冰上 6,4℃、,4000RPM离心,收集沉淀,用2ml冰预冷的0.1mol/LCaCl2溶液重悬菌体 7,分装重悬好的感受态细胞,每管100ul,,70℃冰箱冻存。 发自小木虫Android客户端 |
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yangyubaba2楼2017-01-03 20:36:27
3楼2017-01-04 15:57:07
5楼2017-02-22 15:20:21