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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒中一部分测序，但是杂峰太多，影响结果。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)

[求助] 质粒中一部分测序，但是杂峰太多，影响结果。 已有1人参与

对原始载体（质粒）进行酶切连接，再转化。转化以后，挑取单菌落，提取质粒（用试剂盒提取）。

在送检测序前，用关于插入片段的forward和reverse引物检测插入片段是否在该质粒内。如果有，再把样品送去测序。

测序结果，有很多杂峰，即很多N，即使在序列中段，也时不时出现一小串N。


请问，这样的话是什么原因？有什么建议可以避免这样的现象。
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1楼 2017-01-03 11:35:09
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
顶一下！！！
2楼2017-01-03 16:08:04
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小静儿000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
钱塘幼麟: 金币+3, ★有帮助, 我觉得还是单菌落 2017-01-10 11:15:02
钱塘幼麟: 金币+5, ★有帮助 2017-01-15 15:27:34
你挑斑的时候挑的可能不是单克隆，菌检建议你用载体上通用引物，如果实在不行你就换一种克隆方法，可以试试诺唯赞家的同源重组克隆试剂盒，可能就做出来了
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3楼2017-01-04 11:25:15
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