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[交流]
关于RT-PCR的几个问题
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首先是这几个试剂是什么: SuperscriptllTM逆转录酶 无RNase活性的Dnase1 人胎盘RNAase抑制剂 哪有有卖的啊，价格大概多少。 还有RNA的提取要注意什么，我做的是大鼠海马内PSD95蛋白表达量的变化，有没有哪位大侠做相关的东西的，加我交流一下哦  QQ 112976553 |
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4楼2008-12-11 12:41:20
5楼2008-12-12 10:04:29
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lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
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SuperscriptllTM： invitrogen的逆转录酶的商品名 无RNase活性的Dnase1：有人喜欢用。但是个人觉得用这个酶处理RNA，一样会降解８０％的RNA （３０min），所以不建议用。PCR的时候，把引物放在不同exon即可避免DNA的污染。 人胎盘RNAase抑制剂：加入RT的反应体系，抑制RNA酶 反转录试剂各个公司都有，包括promega，invitrogen、applied biosystems，stratagene。 推荐invitrogen。 买个kit，里面啥都有。 RNA提取可以用ｔｒｉｚｏｌ或者RNeasy kit。 提的时候用RNaseZap或者RNaseAWAY擦枪、管子外壁、板子、台面，去除RNease活力。 其他就没啥了。按着说明书上做就是。 |
6楼2008-12-15 08:13:28