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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » DEAE-sepharose CL-6B 用过一次为什么是絮状的啊
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11哈哈

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-sepharose CL-6B 用过一次为什么是絮状的啊 已有1人参与

我最近纯化蛋白，用的DEAE-sepharose CL-6B,用过一次之后发现，填料跟絮状东西似的，不知道正不正常，难道是填料溶胀吗，请大神指教，万分感谢
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1楼 2016-12-29 09:41:43
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
11哈哈: 金币+2, ★有帮助 2016-12-30 14:57:43
填料的状态和所处的溶剂有很大关系，在水里会是絮状的，在盐溶液里会沉降的比较好
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2楼2016-12-29 14:22:07
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11哈哈

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qingxiayuan at 2016-12-29 14:22:07
填料的状态和所处的溶剂有很大关系，在水里会是絮状的，在盐溶液里会沉降的比较好

首先谢谢你，可我还是有些疑惑，我的填料买的液体的，说明上说洗去酒精可以直接用，装填料时是颗粒状的，可是用了一天之后，卸下来加上水就变成絮状的了，在整个过柱子的过程中，都是用的不同浓度的氯化钠溶液梯度洗脱，或是用缓冲溶液洗脱，难道就是因为我最后卸下后用水融了，多以才变成絮状的了吗？有没有可能是长菌了？这样对填料的性能有没有影响啊，请大神指教
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3楼2016-12-30 14:48:06
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 11哈哈 at 2016-12-30 14:48:06
首先谢谢你，可我还是有些疑惑，我的填料买的液体的，说明上说洗去酒精可以直接用，装填料时是颗粒状的，可是用了一天之后，卸下来加上水就变成絮状的了，在整个过柱子的过程中，都是用的不同浓度的氯化钠溶液梯度 ...

是的，就是颗粒状的，保存在乙醇里，用不同浓度氯化钠洗脱，才用一天不可能长菌啊。我洗的时候如果是水也是絮状的，加的是氯化钠的话就是颗粒状的

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4楼2016-12-30 18:04:13
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11哈哈

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by qingxiayuan at 2016-12-30 18:04:13
是的，就是颗粒状的，保存在乙醇里，用不同浓度氯化钠洗脱，才用一天不可能长菌啊。我洗的时候如果是水也是絮状的，加的是氯化钠的话就是颗粒状的
...

哦哦，谢谢啦 为什么会这样啊，对填料的性能会有影响吗
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5楼2016-12-31 13:20:37
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)
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5楼: Originally posted by 11哈哈 at 2016-12-31 13:20:37
哦哦，谢谢啦 为什么会这样啊，对填料的性能会有影响吗...

我觉得是电荷的影响，个人认为不影响填料性能
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6楼2016-12-31 14:53:19
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11哈哈

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by qingxiayuan at 2016-12-31 14:53:19
我觉得是电荷的影响，个人认为不影响填料性能...

我今天试了一下，第一次用的时候分出来的峰稍有不同，第一次的小峰，这次没有了。
我现在用这个填料，用ph8.5的Tris-HCl，可是我的目标蛋白还是直接穿过，不能跟树脂结合，接下来，我打算增大ph值，可是不知道选什么缓冲溶液，大神你知道这个填料碱性缓冲溶液选什么比较好吗
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7楼2016-12-31 22:11:09
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