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bickychen金虫 (初入文坛)
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[求助]
请教各位，BSA能否识别、结合环腺苷酸（cAMP）？
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小菜一枚，最近在做配体结合实验，配体用的sigma家的cAMP螯合树脂珠，用BSA作的对照，跑15%SDS-PAGE发现BSA也有结合。 操作流程如下： 1 用1ml buffer1重悬树脂珠，取50μl树脂珠悬液与250μg目的蛋白或BSA 4℃ 孵育20min， 短暂离心，小心去上清 2 用含500mM的 washing buffer 清洗树脂珠，离心去上清 重复三次 3 用50μl 2X SDS上样buffer重悬树脂珠，沸水浴10min。跑15% SDS-PAGE 结果发现BSA的泳道也有条带，起初以为清洗得不彻底，又加大W.B.体积做了一次，发现还是有结合，请问这是怎么回事？是BSA能结合cAMP吗？还是我的操作哪里不对？ |
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bickychen
金虫 (初入文坛)
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2楼2016-12-27 15:50:42