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LTcamellia

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC 初步分析药材粗提物的成分 已有1人参与

哪位能帮我解释一下0到20min的HPLC图是怎么回事吗,每个萃取部位在2-4min都出现类似的峰,是溶剂峰吗,其他人用这个柱子没有出现这样的情况,6-18min很聚集的那一堆峰又是什么情况,我重新设置了梯度洗脱,这段峰还是没有很大改善,没有分开,是我样品的问题吗,请大神们帮我分析分析啊。这是刚95%乙醇提取完,正丁醇萃取部分,出峰很少,从这张图能得出什么结论?意味着所包含的化合物少,还是我摸的梯度,或是提取分离条件不当还是其他呢

HPLC 初步分析药材粗提物的成分
1482759288(1.png
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舞阳cxy

新虫 (初入文坛)

那是成分啊,有很多东西,你改一下条件,要么延长时间,把那一块东西跑出来,不要挤成一堆

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2楼2016-12-26 23:57:24
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舞阳cxy

新虫 (初入文坛)

你三十五分钟以后的时间可以缩短,那么长都没东西,变化梯度快一点,不要拖那么久,掐掉十分钟

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3楼2016-12-26 23:58:18
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yuanhulu123

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
哎呀,这个就是练手的液相条件的优化了,能把中药的指纹图谱做出来,做别的液相你就是高手了,建议你优化流动相梯度,把20分钟之后的缩短点,把挤在一起的峰都分开

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4楼2016-12-27 00:07:46
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LTcamellia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuanhulu123 at 2016-12-27 00:07:46
哎呀,这个就是练手的液相条件的优化了,能把中药的指纹图谱做出来,做别的液相你就是高手了,建议你优化流动相梯度,把20分钟之后的缩短点,把挤在一起的峰都分开
...

先谢谢解答。我重新设置梯度,0-25min,乙腈10%-18%,25-55min,25%-60min,跑出了下面的图。0-2min那依旧没有分开,紫外吸收强度在100mAu左右。峰都在前面出了,这些成分的极性是不是很大?还有前沿峰,进的40ul,可能是进样量太大了。 而且在50-60min快结束的时候,也总是有两个峰,也是成分吗?
HPLC 初步分析药材粗提物的成分-1
图片1.png

5楼2016-12-27 08:48:39
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yuanhulu123

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
LTcamellia: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-12-27 09:00:18
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5楼: Originally posted by LTcamellia at 2016-12-27 08:48:39
先谢谢解答。我重新设置梯度,0-25min,乙腈10%-18%,25-55min,25%-60min,跑出了下面的图。0-2min那依旧没有分开,紫外吸收强度在100mAu左右。峰都在前面出了,这些成分的极性是不是很大?还有前沿峰,进的40ul, ...

最前边的峰可能是一些不保留得物质,把有机相在减少一点分不开,就没有办法了,这个图比上一张好了很多,后边的两个峰也是两个成分

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6楼2016-12-27 08:53:32
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LTcamellia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuanhulu123 at 2016-12-27 00:07:46
哎呀,这个就是练手的液相条件的优化了,能把中药的指纹图谱做出来,做别的液相你就是高手了,建议你优化流动相梯度,把20分钟之后的缩短点,把挤在一起的峰都分开
...

先谢谢解答。我重新设置梯度,0-25min,乙腈10%-18%,25-55min,25%-60min,跑出了下面的图。0-2min那依旧没有分开,紫外吸收强度在100mAu左右。峰都在前面出了,这些成分的极性是不是很大?还有前沿峰,进的40ul,可能是进样量太大了。 而且在50-60min快结束的时候,也总是有两个峰,也是成分吗?
HPLC 初步分析药材粗提物的成分-2
图片1.png

7楼2016-12-27 08:54:31
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LTcamellia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 舞阳cxy at 2016-12-26 23:58:18
你三十五分钟以后的时间可以缩短,那么长都没东西,变化梯度快一点,不要拖那么久,掐掉十分钟

先谢谢解答了。我重新设置梯度,0-25min,乙腈10%-18%,25-55min,25%-60min,跑出了下面的图。0-2min那依旧没有分开,紫外吸收强度在100mAu左右。峰都在前面出了,这些成分的极性是不是很大?还有前沿峰,进的40ul,可能是进样量太大了。 而且在50-60min快结束的时候,也总是有两个峰,也是成分吗?
HPLC 初步分析药材粗提物的成分-3
图片1.png

8楼2016-12-27 08:56:06
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LTcamellia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yuanhulu123 at 2016-12-27 08:53:32
最前边的峰可能是一些不保留得物质,把有机相在减少一点分不开,就没有办法了,这个图比上一张好了很多,后边的两个峰也是两个成分
...

好的,谢谢你啦,
9楼2016-12-27 08:59:30
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