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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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提剑的书生

实习版主

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[求助] 260/230最高有2.3是为什么? 已有2人参与

用的百泰克试剂盒提取的RNA,测浓度的时候发现260/230很高,听说这个试剂盒很容易导致这样的结果,烦请各位帮忙解释一下吧,谢谢啦。

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peitaokong

专家顾问

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得你首先要明白吸光度各个参数的意义
280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。
A230 测定其它碳源物质,如酚,糖类等;
A260 是核酸的吸收峰测 RNA 和 DNA,引物等的浓度用的;A260*40ng/μL这个值就是RNA的浓度,DNA A260*50ng/μL这个值就是DNA的浓度。
A280 是蛋白质的吸收峰。
一般的,我们只看 OD260/OD280(Ratio,R)——1.8~2.0时,我们认为 RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的,不过要注意,当用 Tris 作为缓冲液检测吸光度时,R 值可能会大于 2(一般应该是<2.2的)。当 R<1.8时,溶液中蛋白或者其他有机物的污染比较明显,你可以根据自己的需要决定这份RNA 的命运。当 R>2.2时,说明 RNA 已经水解成单核酸了。 纯RNA 的A260/A280的比值为 2.0。
OD260/OD230的比值还表明 RNA 的纯度——其值 <2.0 表明裂解液中有亚硫氰胍和β-巰基乙醇残留,其值   >2.4,需用乙酸盐,乙醇沉淀 RNA。
2楼2016-12-22 17:33:16
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peitaokong

主管区长

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【答案】应助回帖

OD260/OD230在2.0到2.4之间我觉得是没有什么问题的。
3楼2016-12-22 17:38:39
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biotech_zhou

专家顾问

待人以诚:专业/专注/专心

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
处于2.0~2.5之间,不是挺好的的么,综合考虑OD260/OD280的数值。
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
4楼2016-12-24 12:52:54
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古贝壳

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

请问我一瓶10七次方细胞提出细胞浓度为350ng/ul,这个浓度合适吗?还有我的260/230比值是1.5左右,这个值低是怎么回事呢?但我的260/280是2.06左右

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5楼2017-03-21 21:38:24
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