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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么p 不出来？
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wenwanhong

新虫 (初入文坛)
用primerstar聚合酶很好p

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11楼2016-12-21 16:18:07
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-22 07:40:41
模板高GC含量，应该GC buffer和PCR buffer一起使用
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12楼2016-12-21 16:51:46
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Mr.Peter

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-21 16:51:46
模板高GC含量，应该GC buffer和PCR buffer一起使用

用了GC 那一套的，也没有

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13楼2016-12-21 22:37:26
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Mr.Peter

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by wenwanhong at 2016-12-21 16:18:07
用primerstar聚合酶很好p

高保真酶的话改天试试

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14楼2016-12-21 22:37:52
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贝壳989

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
设置阳性及阴性对照。退火温度降低点

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贝壳 ccccccccc
15楼2016-12-21 23:23:59
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论坛小虫虫

至尊木虫 (著名写手)
引物设计有问题吧

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16楼2016-12-21 23:39:33
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xucb970

金虫 (小有名气)
看看你的dNTP有没有拿错。

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宁坐板凳十年冷，不写文章半句空。
17楼2016-12-22 00:03:20
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Alice 2016

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果模板是cDNA的话，你看看你逆转的时候加的是什么引物，建议不要加随机引物，因为可能导致最后得到的目的片段不完整。我之前买了诺唯赞的逆转录盒子，用了随机引物，一直没有条带，后来换成oligo dT逆转 就有结果了。还有我觉得上样量不少，因为逆转产物为混合物，可能含有抑制物，所以不建议多加。
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怕什么真理无穷，进一寸有一寸的欢喜
18楼2016-12-22 09:17:39
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司空呆呆

新虫 (小有名气)
可以把时间拉的再长一些

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19楼2016-12-22 09:37:34
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浮笙若梦

铁虫 (初入文坛)
我用phanta max，一次就出来了
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20楼2016-12-22 09:54:00
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