24小时热门版块排行榜    

查看: 355  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zflibya

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求助:样品加到血浆后保留时间提前?

不知道各位在做体内药分时有没有遇到过这种情况
做QC样品时,将样品加到空白血浆,再用乙腈或者甲醇沉淀蛋白后,吸取上清液,氮气吹干。残渣用流动相(80%甲醇:20%水)溶解进样。结果样品的出峰时间提前了将近一分钟。将流动性中的水换成0.1%的甲酸后保留时间就跟标准品一致了,但是灵敏度就下降了很多。换成是什么原因呢?该怎么避免呢?
请教各位指点……
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zflibya

铁虫 (初入文坛)

多谢各位的解答
沉淀蛋白后吹干是为了富集哈

我用的是waters 的柱子 2.1*50 cm
QC样品保留时间比用有机试剂溶解的样品时间提前了一分钟左右
这种时间的变化正常的吗?

还有 想请问2楼
“上述情况无需避免,因为没有必要。我们在提供材料的时候,所提供的待测血浆样品,qc样品和专属性考察的图谱都是有血浆存在并经过上述方法处理过的,它们的保留时间必须是一致。”
请问有什么资料支持上述说法吗?可否提供给我参考一下?
5楼2008-12-11 18:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

zflibya

铁虫 (初入文坛)

怎么没有人回帖,都没遇到过这种情况吗?
2楼2008-12-09 22:34:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snowmail2000

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复!
楼主的意思是不是说,qc样品和在考察条件时同用有机溶解溶解的样品之间的保留时间。这种差别在实际过程中确实是存在的。原因是由于上述两份样品的ph不同。上述情况无需避免,因为没有必要。我们在提供材料的时候,所提供的待测血浆样品,qc样品和专属性考察的图谱都是有血浆存在并经过上述方法处理过的,它们的保留时间必须是一致。
顺便请教下,为何采用沉淀蛋白的方法后不直接进样,而继续吹干?是想让峰行变好么?

[ Last edited by snowmail2000 on 2008-12-11 at 10:47 ]
沈阳药科大学药学院
3楼2008-12-10 11:02:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙行天下8388

新虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复!
蛋白沉淀后又吹干富集,
可能是样品量太低的缘故吧。
样品几分钟出峰的,峰前移后与杂质峰有干扰吗?
可试过用磷酸盐缓冲液?
4楼2008-12-10 13:08:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见