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上官abc金虫 (正式写手)
王下七武海
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[交流]
重组蛋白挂不上柱子，能否通过改变诱导条件来改变其折叠情况?
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我的重组蛋白镍柱纯化挂不上柱子，应该是hiS标签被包埋了，然后我就把重组蛋白用含8M尿素的溶解液将蛋白质重新溶解，上柱子纯化，这次在高浓度咪唑出出现了目的蛋白。这样的得到的目的蛋白算是包涵体还是正常蛋白呢？毕竟我看到有人说尿素溶解会使蛋白质变性。 另外，能不能通过改变诱导条件来改变表达蛋白的折叠情况来使HiS标签外露呢？一般都选择哪些条件来改变？谢谢了！ |
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9楼2016-12-20 14:16:47
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2楼2016-12-17 23:12:33
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-18 00:41:17
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我用16度0.6mM iptg 200rpm摇。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-12-17 23:13:41
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-18 00:41:39
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收集蛋白滤液检测一下看看有没有挂住，如果这一步挂上去了，那就是洗的时候洗掉了 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-12-17 23:15:09