应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR反应中出现的问题
111/2返回列表12下一页
查看: 995  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

欣晴5832

金虫 (小有名气)

[交流] PCR反应中出现的问题

前段时间pcr用10微升体系可以扩出来，因准备测序，加大体系后反而扩不出来，不知道是哪儿出了问题，请各位帮忙分析一下，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-12-08 20:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gxsulong

至尊木虫 (著名写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
可能你忘了加某个样品，呵呵！我要加大反应体系的时候一般都是先混合一起加，然后分装成小体系做PCR。
赞一下(10人) 回复此楼
霉菌
2楼2008-12-08 21:42:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lipishun

金虫 (小有名气)
如果扩大扩增不出来，建议小量多管
哈哈
赞一下 回复此楼
3楼2008-12-08 21:47:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣晴5832

金虫 (小有名气)
我做的体系是50微升，所以就单个加的，加完之后混匀
小量多管对测序会有影响吗？
赞一下 回复此楼
4楼2008-12-09 18:47:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fraser

银虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励新虫~~
原来也出现过这种现象,50微升的体系产量还没10微升的多,建议小管,然后一起回收
赞一下(10人) 回复此楼
5楼2008-12-10 13:47:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)
很正常的现象，重新做吧，虽然你认为每次同样的条件做PCR，但每次都是不一样的
赞一下 回复此楼
帮助虫友，提升自己
6楼2008-12-11 05:14:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenlanf

铜虫 (小有名气)
首先，你要确认你使用的试剂物品都是一致的，如果从小体系变到大体系换了成分，那么出现这样的情况不出奇。
其次，抱着探索的精神，你可以配一个大体系，然后分装成小体系，与大体系同时进行实验，再看看试验结果。
如果小体系有带，而大体系没有，可以适当尝试将变性，T值，复性的时间适当增加。
当然，如果没时间去探索这么多，直接做几个小体系混合就OK了。。。
赞一下 回复此楼
7楼2008-12-11 14:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣晴5832

金虫 (小有名气)
少量多管，最后将产物混合进行测序，会对测序结果有影响吗？
赞一下 回复此楼
8楼2008-12-11 20:36:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yidaqunyan

木虫 (正式写手)

博士
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 欣晴5832 at 2008-12-11 20:36:
少量多管，最后将产物混合进行测序，会对测序结果有影响吗？

一个管也是P十个管也是P，反正你小体系条件摸好了，就不要变了，电泳的时候多点样就好了，回收也方便
赞一下(1人) 回复此楼
不孝有三，读博为大！
9楼2009-06-30 15:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxiaofei

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1注意混样
2 注意做对照。排除污染。最好是相同的东西，同时做一个10μ的，做一个20μ的。看下到底是什么原因。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-06-30 16:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 欣晴5832 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +8 硕星赴 2026-03-23 8/400 2026-03-24 20:17 by peike
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:17 by pswait
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 0703化学求调剂 +4 奶油草莓. 2026-03-22 5/250 2026-03-23 19:37 by pswait
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭