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欣晴5832

金虫 (小有名气)

[交流] PCR反应中出现的问题

前段时间pcr用10微升体系可以扩出来,因准备测序,加大体系后反而扩不出来,不知道是哪儿出了问题,请各位帮忙分析一下,谢谢!
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yangxiaofei


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1注意混样
2 注意做对照。排除污染。最好是相同的东西,同时做一个10μ的,做一个20μ的。看下到底是什么原因。
10楼2009-06-30 16:05:08
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
可能你忘了加某个样品,呵呵!我要加大反应体系的时候一般都是先混合一起加,然后分装成小体系做PCR。
霉菌
2楼2008-12-08 21:42:24
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lipishun

金虫 (小有名气)

如果扩大扩增不出来,建议小量多管
哈哈
3楼2008-12-08 21:47:28
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

我做的体系是50微升,所以就单个加的,加完之后混匀
小量多管对测序会有影响吗?
4楼2008-12-09 18:47:01
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