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9楼: Originally posted by 张小蛋 at 2016-12-16 16:34:14
嗯嗯,我们确实也在用重组酶,但是这个摩尔浓度比用1.:1:1怎么样?
...

11楼2016-12-16 17:06:04
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生物狗-哈

新虫 (初入文坛)

同源重组啊,据说诺唯赞的可以做5个片段以内的,不用考虑酶切位点
12楼2016-12-16 17:22:33
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张小蛋

新虫 (小有名气)

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11楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-16 17:06:04
...

这是可以的意思吗,哈哈哈

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13楼2016-12-16 18:02:28
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张小蛋

新虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-15 23:37:32
设计引物可进行重叠PCR,酶的话最好用高保真的。

pfu效率会不会太低了点

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14楼2016-12-16 18:03:58
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张小蛋

新虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by mochenmi at 2016-12-16 00:06:21
pcr是最快的,如果一定要用酶切连接,就用一个中间载体吧

就是片段太长了,我没太有把握

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15楼2016-12-16 18:04:28
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张小蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 生物狗-哈 at 2016-12-16 17:22:33
同源重组啊,据说诺唯赞的可以做5个片段以内的,不用考虑酶切位点

嗯哒嗯哒,我们用的好像不是这个牌子,但也是利用一步克隆方法,不知道是否可以不考虑酶切位点呢

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16楼2016-12-16 18:05:35
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张小蛋

新虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by wuyuanqing at 2016-12-16 00:56:44
全式金的fastpfu或者NEB的Q5
...

谢谢,我尝试一下

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17楼2016-12-16 18:09:54
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