应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 三个片段通过酶切连接方法连成线性片段
172/2返回列表上一页12
查看: 4453  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jurkat.1640
引用回帖:
9楼: Originally posted by 张小蛋 at 2016-12-16 16:34:14
嗯嗯，我们确实也在用重组酶，但是这个摩尔浓度比用1.:1:1怎么样？
...

11楼2016-12-16 17:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物狗-哈

新虫 (初入文坛)
同源重组啊，据说诺唯赞的可以做5个片段以内的，不用考虑酶切位点
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2016-12-16 17:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张小蛋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-16 17:06:04
...

这是可以的意思吗，哈哈哈

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
13楼2016-12-16 18:02:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张小蛋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-15 23:37:32
设计引物可进行重叠PCR，酶的话最好用高保真的。

pfu效率会不会太低了点

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
14楼2016-12-16 18:03:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张小蛋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mochenmi at 2016-12-16 00:06:21
pcr是最快的，如果一定要用酶切连接，就用一个中间载体吧

就是片段太长了，我没太有把握

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2016-12-16 18:04:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张小蛋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 生物狗-哈 at 2016-12-16 17:22:33
同源重组啊，据说诺唯赞的可以做5个片段以内的，不用考虑酶切位点

嗯哒嗯哒，我们用的好像不是这个牌子，但也是利用一步克隆方法，不知道是否可以不考虑酶切位点呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
16楼2016-12-16 18:05:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张小蛋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wuyuanqing at 2016-12-16 00:56:44
全式金的fastpfu或者NEB的Q5
...

谢谢，我尝试一下

发自小木虫Android客户端
回复此楼
17楼2016-12-16 18:09:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 张小蛋 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 20/1000 2026-11-06 07:55 by GBJlw5zzHWpZ
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 16/800 2026-11-06 07:55 by GBJlw5zzHWpZ
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:43 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 05:33 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 05:21 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:21 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:15 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 04:58 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:26 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭