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western blot总有很多杂带
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自己做的蛋白质印迹总是有很多杂带，样品是裂解的组织蛋白，一抗是自己做的单抗和B actin。每次都是内参亮，但内参有些不那么亮的杂带，而自己孵育单抗的泳道，一堆带，都不太亮，根本区分不出哪条是目的条带。我想知道自己的是背景过高吗？我已经改进封闭条件，用3%，5%的BSA和5%的脱脂乳试过，室温封闭4h，一抗二抗都用含1%BSA的PBST配置，每次洗5min/6次，一抗孵育过室温摇床1h和2h.二抗40min.感觉不知道该如何处理背景过高了。 @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端 |
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