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western blot总有很多杂带
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自己做的蛋白质印迹总是有很多杂带,样品是裂解的组织蛋白,一抗是自己做的单抗和B actin。每次都是内参亮,但内参有些不那么亮的杂带,而自己孵育单抗的泳道,一堆带,都不太亮,根本区分不出哪条是目的条带。我想知道自己的是背景过高吗?我已经改进封闭条件,用3%,5%的BSA和5%的脱脂乳试过,室温封闭4h,一抗二抗都用含1%BSA的PBST配置,每次洗5min/6次,一抗孵育过室温摇床1h和2h.二抗40min.感觉不知道该如何处理背景过高了。 @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端 |
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