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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助重组蛋白量和抑菌活性不成正比是为什么？
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fairytale527

[交流] 求助重组蛋白量和抑菌活性不成正比是为什么？

我做重组蛋白表达

工程菌在37°C和25°C下诱导，在37°C下诱导记为L2,在25°C下诱导记为L3.
L2,L3的蛋白电泳，L2比L3的目标条带粗，蛋白表达量大，
抑菌圈活性，L2 比L3 抑菌圈小，
为什么会出现这种情况呢？
不是，表达量大抑菌圈也应该相对大吧。蛋白电泳图和抑菌实验结果不一致哦。

同一种蛋白不同温度下诱导，每个单位的蛋白活力会不一样？谢谢

L2,L3的蛋白电泳样品是超声波破碎后离心的上清。
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1楼 2008-12-07 15:34:24
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fairytale527

引用回帖:
Originally posted by xiaoyur at 2008-12-9 10:13:
很正常了,量大可能是包涵体比较多,而包涵体多是无活性的蛋白,
相反,表达量少的可能有活性的蛋白较多.

L2,L3是上清，
跑电泳的样品是上清哦
包涵体都在沉淀中，呵呵。
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5楼2008-12-09 16:42:34
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huangyeke

铜虫 (正式写手)
★
fairytale527(金币+1,VIP+0):谢谢
为什么不纯化下再做抑菌实验呢？蛋白表达后直接破碎细胞做抑菌，这样杂质太多了，说不清楚
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2008-12-07 18:33:28
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
★
fairytale527(金币+1,VIP+0):抑菌圈大小为什么不能反映蛋白活性的大小呢？不能定量也能定性吧，总能说明个趋势。
还有人在做重组蛋白的抑菌活性？


抑菌圈能反映蛋白活性的大小？


陆地上有抑菌作用的物质基本都找完了，做这个还有什么意义？很古老的课题，如果在一百年前还算有新意。

[ Last edited by hihoney on 2008-12-7 at 18:58 ]
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3楼2008-12-07 18:57:42
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xiaoyur

金虫 (著名写手)
很正常了,量大可能是包涵体比较多,而包涵体多是无活性的蛋白,
相反,表达量少的可能有活性的蛋白较多.
赞一下 回复此楼
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
4楼2008-12-09 10:13:21
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